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3.1 Charakterisierung des Sec61-Komplexes aus Canis familiaris
achten, bei einem Potenzial von +35 mV (K + trägt positive Ladung) verweilt der Kanal
in einer fast vollständig geöffnet Konformation.
Eine Darstellung der Daten als Offenwahrscheinlichkeit bestätigt diese Beobachtung
(Abbildung 3.7 b). Bei positiven Haltepotenzialen (Ca 2+ trägt positive Ladung) ist die
Wahrscheinlichkeit dafür, dass sich der RM-Kanal in einem offenen Zustand befindet
im Vergleich zu den entsprechenden negativen Klemmspannungen (K + trägt positive
Ladung) deutlich verringert. In Kontrollexperimenten mit umgekehrter Elektrolytbefül-
lung der Messkammern ist ein spiegelbildlicher Verlauf der Offenwahrscheinlichkeit mit
niedrigeren Werten bei negativen Spannungen zu beobachten. Im Gegensatz dazu zeigt
die Offenwahrscheinlichkeit des aufgereinigten Sec61-Komplexes unter biionischen Be-
dingungen keine Abhängigkeit von der Membranpolarisation, sondern einen symmetri-
schen Verlauf für positive (Ca 2+ trägt positive Ladung) und negative (K + trägt positive
Ladung) Haltepotenziale (Abbildung 3.7 c).
In Abbildung 3.7 d werden die Leitwerte des Kanals aus RM-Proben unter biionischen
Bedingungen als Häufigkeitshistogramm für positive und negative Membranpotenziale
getrennt voneinander dargestellt. Es zeigen sich ähnliche Verteilungen wie unter symme-
trischen KCl- und CaCl2-Elektrolytbedingungen (Abbildung 3.3 a,c). Der Hauptleitwert
bei positiven Haltepotenzialen (K + trägt positive Ladung) beträgt 168 pS ± 3 pS, der
Unterleitwert liegt bei 487 pS ± 21 pS. Bei negativen Klemmspannungen (Ca 2+ trägt
positive Ladung) ergibt sich ein Hauptleitwert von 169 pS ± 5 pS und ein in seinem
Auftreten deutlich reduzierter Unterleitwert von 699 pS ± 23 pS (n=1088 Schaltereig-
nisse).
Zusammenfassend bestätigen die Experimente unter biionischen Bedingungen die Er-
gebnisse der Versuche mit symmetrischen KCl- und CaCl2-Elektrolytlösungen in Bezug
auf Leitwertverteilungen (3.1.3) und Offenwahrscheinlichkeiten (3.1.6).
3.1.8 Interaktion mit Lanthan- und Aluminiumionen
Lanthanionen sind als hochaffine Effektoren von Calciumkanälen bekannt und blockieren
deren Ionenpermeation mit hoher Effizienz (Hille, 2001, Seite 123). Dabei interagieren
sie mit Ca 2+ -Bindestellen in der Porenregion, wodurch Ca 2+ -Ionen sowohl sterisch als
auch elektrostatisch in ihrer Permeation behindert werden (Lansman, 1990). Es sollte
untersucht werden, wie sich die elektrophysiologischen Eigenschaften des Sec61-Kanals
nach Zugabe von LaCl3, auch im Vergleich zu Messungen mit CaCl2-Elektrolytlösungen,
verändern.
Abbildung 3.8 zeigt die entsprechenden Ergebnisse in Bezug auf Leitwerte und Umkehr-
potenziale. Für den Sec61-Kanal aus rauen Mikrosomen können in Anwesenheit von
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