Untersuchungen zur bakteriellen Erkrankung Acidovorax ...

MATERIAL UND METHODEN
2.3.1 Fluoreszenz
Zur Prüfung der Fluoreszenz wurden die auf KB-Agar-Platten wachsenden Kolonien
unter eine Schwarzlichtlampe gehalten. Handelt es sich bei den zu testenden
Kolonien um A. valerianellae-Bakterien, so fluoreszieren sie nicht. Sie sind daher
deutlich von den fluoreszierenden Pseudomonaden zu unterscheiden.
2.3.2 Gramreaktions-Test (nach SUSLOW et al., 1982)
Zum Test der Gramreaktion wurden zu testende Einzelkolonien beziehungsweise
Reinkulturen auf einer Impföse in einen Tropfen 1 %-iger Kaliumhydroxid (KOH)-
Lösung auf einem Objektträger verrieben. Handelt es sich um A. valerianellae-
Bakterien, so bildet sich aufgrund der Zellwandzusammensetzung des Gram-
negativen Bakteriums ein Faden, wenn man die Impföse langsam aus dem Tropfen
hebt.
2.3.3 Mikrobiologie Bactident® Oxidase-Test (nach KOVACS,
1956)
Zum Test der Oxidase-Tätigkeit, wobei es sich um einen Nachweis der
Cytochromoxidase in Mikroorganismen handelt, werden Einzelkolonien
beziehungsweise Reinkulturen auf einer Impföse auf die Reaktionszone eines
Teststäbchens aufgetragen und verrieben. Die Teststäbchen stammen von der Firma
Merck KGaA aus Darmstadt. Nach 20 bis 60 Sekunden wird die Reaktion mit einer
Farbskala verglichen (Abb. 2.1). In Anwesenheit molekularen Sauerstoffs kann das
Cytochromoxidase/Cytochrom c-System eine ganze Reihe von organischen
Substanzen reduzieren, unter anderem das sogenannte NaDi-Reagenz (1-Naphthol +
Dimethyl-paraphenylendiamin) unter Bildung des Kondensationsmoleküls
Indophenolblau. Diese Reaktion wird zur Klassifizierung und Identifizierung von
Bakterien verwendet. Handelt es sich bei der zu testenden Kultur um
A. valerianellae-Bakterien, so färbt sich die Reaktionszone blau bis blauviolett und
die Kultur gilt als Oxidase-positiv.
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