(Rättsakter vilkas publicering är obligatorisk) KOMMISSIONENS ...

21.8.2001 L 225/165
Europeiska gemenskapernas officiella tidning
SV
HCO-40. Om man använder agenter som är biologiskt lättnedbrytbara (t.ex. aceton) eller agenter med hög
flyktighet bör man iaktta särskild försiktighet eftersom sådana agenter kan orsaka problem med bakterieansamling
vid genomflödestest. Om en lösningsagent används får den inte ha signifikant verkan på fisktillväxten eller
framkalla synliga skadliga verkningar på de unga exemplaren (verkningar som framkommit vid test med rent
lösningsmedel).
För genomflödestest behövs ett system som kontinuerligt portionerar och späder ut stamlösning av testämnet
så att man får en tillförsel av en serie koncentrationer till testkärlen. Stamlösningens och spädvattnets flödeshastighet
bör kontrolleras regelbundet, helst dagligen, och får inte variera med mer än 10 % under hela testet.
Resultaten från ett ringtest (3) har visat att en vattenavlägsning på 6 liter per gram fisk och dag är godtagbar
vid test på regnbågslax (se avsnitt 1.8.2.2.).
För halvstatiskt test (statisk förnyelse) beror mediets förnyelsefrekvens på testämnets stabilitet, men daglig förnyelse
rekommenderas. Om resultaten från preliminära stabilitetstest (se avsnitt 1.4) visar att testämnet inte är
stabilt (dvs. utanför området 80—120 % av nominell koncentration eller under 80 % av uppmätt startkoncentration)
under ett helt förnyelseintervall måste genomflödestest övervägas.
1.6.4 Val av fiskart
De flesta erfarenheterna från ringtest (1) (3) gäller regnbågslax (Oncorhynchus mykiss) och därför rekommenderas
denna art för testet. Även andra väldokumenterade arter kan användas, men då måste testförfarandet eventuellt
anpassas så att lämpliga testförhållanden erhålls. Det finns t.ex. erfarenheter från test med sebrafisk (Danio
rerio) (4) (5) och ricefish (medaka, Oryzias latipes) (6) (7) (8). I ett sådant fall måste motiveringen för valet
av art och testmetod rapporteras.
1.6.5 Förvaring av fisk
Testfiskarna skall tas från en population från en enda stam, helst från samma romläggning. Fiskarna bör, under
minst två veckor före testets början, hållas i vatten med samma kvalitet och ljusförhållanden som det som
används under testet. Fiskarna bör utfodras med en minimiportion på 2 % kroppsvikt per dag, helst 4 %
kroppsvikt per dag, under hela förvaringsperioden och under testet.
Efter en inledande period på 48 timmar registreras mortaliteten och följande kriterier tillämpas:
— Om mortaliteten under sju dagar är högre än 10 % av populationen bör hela satsen förkastas.
— Om mortaliteten ligger mellan 5 och 10 % av populationen fortsätts acklimatiseringen under ytterligare
sju dagar. Om mortaliteten under den andra sjudagarsperioden är högre än 5 % bör hela satsen förkastas.
— Om mortaliteten under sju dagar är lägre än 5 % av populationen kan satsen godtas.
Fiskarna bör inte ges behandling mot sjukdomar under de två veckorna före testet eller under testets gång.
1.7 TESTUTFORMNING
Begreppet ”testutformning” hänför sig till valet av antalet testkoncentrationer och deras inbördes nivåskillnad,
antalet kärl vid varje koncentration och antalet fiskar per kärl. Vid testutformningen bör följande beaktas:
a) Undersökningens syfte.
b) Den statistiska analysmetod som kommer att användas.
c) Tillgången till försöksresurser och deras kostnader.
När det gäller undersökningens syfte bör man, om möjligt, specificera de statistiska krav som gäller för detekteringen
av en given skillnad (t.ex. avseende tillväxthastighet) eller, alternativt, den noggrannhet med vilken
EC x (t.ex. x = 10, 20 eller 30 och helst inte under 10) måste bestämmas. Utan detta kan en hållbar definition
av undersökningens storlek inte ges.