(Rättsakter vilkas publicering är obligatorisk) KOMMISSIONENS ...

21.8.2001 L 225/247
Europeiska gemenskapernas officiella tidning
SV
1.4 INFORMATION OM TESTÄMNET
Resultat från test avseende akut toxicitet (se metod C.2, del I) som utförts på Daphnia magna bör finnas tillgängliga.
Resultaten kan vara användbara vid valet av lämpliga testkoncentrationer för reproduktionstest. Data
om testämnets vattenlöslighet och ångtryck bör vara kända och man bör ha tillgång till en tillförlitlig analysmetod
för kvantifiering av ämnet i testlösningarna med rapporterad återhämtningsgrad och bestämningsgräns.
För definition av testförhållandena bör man ange bl.a. testämnets strukturformel, renhet, stabilitet i ljus, stabilitet
vid testförhållandena, pKa, P ow och resultaten från test för biologisk lättnedbrytbarhet (se metod C.4).
1.5 TESTETS GILTIGHET
För att ett test skall vara giltigt måste följande kriterier uppfyllas för kontrollgruppen (kontrollgrupperna):
— Föräldragenerationens mortalitet (honor av Daphnia) får inte överskrida 20 % vid testets slut.
— Det genomsnittliga antalet avkommor som har producerats per föräldradjur och som lever vid testets slut
måste vara Å 60.
1.6 BESKRIVNING AV TESTMETODEN
1.6.1 Utrustning
Testkärl och annan apparatur som kommer i kontakt med testämnet bör vara tillverkade av glas eller annat
kemiskt inert material. I regel används glasbägare.
Dessutom behövs åtminstone en del av följande utrustning:
— Syrgasmätare (med mikroelektrod eller annan lämplig anordning för mätning av löst syrgas i lågvolymsprover).
— Utrustning för temperaturreglering.
— pH-meter.
— Utrustning för bestämning av vattnets hårdhetsgrad.
— Utrustning för bestämning av totalt organiskt kol (TOC) i vattnet eller utrustning för bestämning av
kemisk syreförbrukning (COD).
— Apparatur för reglering av belysningen och mätning av ljusets intensitet.
1.6.2 Testorganism
Testet utförs på Daphnia magna Straus. Andra Daphnia-arter kan användas förutsatt att de uppfyller tillämpliga
giltighetskriterier (ett relevant giltighetskriterium är reproduktionskapaciteten i kontrollgrupperna). Om andra
arter av Daphnia används måste de identifieras ordentligt och det skall motiveras varför de används.
Klonen skall helst identifieras med hjälp av genotypen. Forskningsresultat (1) har visat att reproduktionskapaciteten
hos klon A (som härrör från IRCHA i Frankrike) (3) genomgående uppfyller giltighetskriteriet som gäller
ett genomsnitt på Å 60 överlevande avkommor per föräldradjur vid odling i de betingelser som beskrivs i
denna metod. Andra kloner kan godtas förutsatt att Daphnia-odlingen kan påvisas uppfylla giltighetskriterierna
för ett test.
Vid testets början måste djuren vara yngre än 24 timmar och får inte tillhöra den första satsen avkomma.
Djuren måste komma från en frisk stam (dvs. de får inte uppvisa tecken på stress, t.ex. hög mortalitet, förekomst
av hanar och ephippia, fördröjd produktion av första satsen avkomma, missfärgade djur osv.). Stamdjuren
måste hållas vid samma odlingsbetingelser (ljus, temperatur, medium, utfodring och djur per volymenhet)
som används vid testet. Om annat än normalt odlingsmedium för Daphnia används vid testet är det tillrådligt
med en acklimatiseringsperiod på i regel cirka tre veckor (dvs. en generation) innan testets inleds, för att undvika
stress på föräldragenerationen.