(Rättsakter vilkas publicering är obligatorisk) KOMMISSIONENS ...
(Rättsakter vilkas publicering är obligatorisk) KOMMISSIONENS ...
(Rättsakter vilkas publicering är obligatorisk) KOMMISSIONENS ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
L 225/166 21.8.2001<br />
Europeiska gemenskapernas officiella tidning<br />
SV<br />
Det <strong>är</strong> viktigt att vara medveten om att en utformning som <strong>är</strong> optimal (bästa utnyttjande av resurser) för en<br />
viss metod för statistisk analys inte nödvändigtvis <strong>är</strong> optimal för en annan. Den utformning som rekommenderas<br />
för uppskattning av LOEC/NOEC <strong>är</strong> d<strong>är</strong>för inte densamma som den utformning som rekommenderas för<br />
regressionsanalys.<br />
I de flesta fall <strong>är</strong> regressionsanalys att rekommendera framför variansanalys. Motiveringen till detta diskuteras<br />
av Stephan och Rogers (9). Om ingen lämplig regressionsmodell finns att tillgå (r 2 < 0,9) bör NOEC/LOEC<br />
användas.<br />
1.7.1 Utformning för regressionsanalys<br />
Följande faktorer <strong>är</strong> viktiga vid utformningen av ett test som skall analyseras med regression:<br />
a) Den koncentration vid vilken verkningar observeras (t.ex. EC 10,20,30) och det koncentrationsområde som<br />
<strong>är</strong> av intresse med tanke på testämnets verkningar måste omfattas av de koncentrationer som används vid<br />
testet. Den noggrannhet med vilken man kan bestämma den koncentration vid vilken verkningar observeras<br />
<strong>är</strong> bäst n<strong>är</strong> den berörda koncentrationen ligger i mitten av det testade koncentrationsområdet. Ett prelimin<strong>är</strong>t<br />
orienterande försök kan vara till hjälp vid valet av lämpliga testkoncentrationer.<br />
b) För att göra det möjligt att uppnå en tillfredsställande statistisk modell bör testet inbegripa minst ett kontrollk<strong>är</strong>l<br />
och fem extra k<strong>är</strong>l vid olika koncentrationer. N<strong>är</strong> en lösningsagent används och n<strong>är</strong> det <strong>är</strong> lämpligt<br />
bör ett kontrollk<strong>är</strong>l som innehåller lösningsagenten vid den högsta testade koncentrationen köras<br />
utöver testserien (se avsnitten 1.8.3 och 1.8.4).<br />
c) En lämplig geometrisk eller logaritmisk serie (10) (se tillägg 3) kan användas. Fördelningen av testkoncentrationerna<br />
skall helst vara logaritmisk.<br />
d) Om man har tillgång till fler än sex k<strong>är</strong>l bör de extra k<strong>är</strong>len användas för replikat eller fördelas över koncentrationsområdet<br />
i syfte att minska skillnaderna mellan de olika koncentrationsnivåerna. Dessa båda<br />
alternativ <strong>är</strong> likv<strong>är</strong>diga.<br />
1.7.2 Utformning för bestämning av NOEC/LOEC med variansanalys (ANOVA)<br />
Det skall helst finnas replikatk<strong>är</strong>l vid varje koncentration och den statistiska analysen bör göras på k<strong>är</strong>lnivå<br />
(11). Utan replikatk<strong>är</strong>l kan man inte beakta variabiliteten mellan k<strong>är</strong>l utöver den som beror på individuella<br />
skillnader mellan fiskar. Erfarenheterna har dock visat (12) att variabiliteten mellan k<strong>är</strong>l i de undersökta fallen<br />
har varit mycket liten jämförd med variabiliteten inom k<strong>är</strong>let (dvs. mellan olika fiskar). Det <strong>är</strong> d<strong>är</strong>för ett relativt<br />
godtagbart alternativ att göra den statistiska analysen på nivån för individuella exemplar.<br />
I regel används minst fem testkoncentrationer i en geometrisk serie med en faktor som helst inte bör överskrida<br />
3,2.<br />
N<strong>är</strong> ett test utförs med replikatk<strong>är</strong>l bör antalet replikatkontrollk<strong>är</strong>l och d<strong>är</strong>med antalet fiskar i regel vara det<br />
dubbla jämfört med antalet vid testkoncentrationerna, och vid testkoncentrationerna bör antalet vara lika stort<br />
(13) (14) (15). Om d<strong>är</strong>emot replikatk<strong>är</strong>l inte används bör antalet fiskar i kontrollgruppen vara lika stort som<br />
antalet vid varje testkoncentration.<br />
Om man utgår från att ANOVA skall grunda sig på k<strong>är</strong>l i stället för individuella fiskar (det senare fallet skulle<br />
inneb<strong>är</strong>a antingen individuell m<strong>är</strong>kning av fiskarna eller användning av pseudospecifika tillväxthastigheter [se<br />
avsnitt 2.1.2]), måste man ha ett tillräckligt antal replikatk<strong>är</strong>l för att möjliggöra bestämning av standardavvikelsen<br />
för koncentrationerna inom k<strong>är</strong>len. Det betyder att frihetsgraderna för fel i variansanalysen bör vara minst<br />
5 (11). Om endast kontrollgrupperna har replikat föreligger det fara för att felvariabiliteten ökar med ökande<br />
medelv<strong>är</strong>de för den berörda tillväxthastigheten. Eftersom tillväxthastigheten sannolikt minskar med ökande<br />
koncentration tenderar detta att leda till en överskattning av variabiliteten.<br />
1.8 FÖRFARANDE<br />
1.8.1 Val och vägning av testfisk<br />
Det <strong>är</strong> viktigt att minimera fiskarnas viktvariationer vid testets början. I tillägg 1 anges lämpliga storleksområden<br />
för de olika arter som rekommenderas för detta test. De individuella vikterna för hela den fisksats som<br />
används för testet bör helst ligga inom ± 10 % av den aritmetiska medelvikten, och får under inga omständig-
Change language