Минск: БГУ, 2011. - БГУ. Сайт биологического факультета

Êóëüòóðà òêàíåé è êëåòîê ËÐ — íîâûé èñòî÷íèê ïîëó÷åíèÿ ËÐÑ 43
Каллусная и клеточная суспензионная культуры растений
Методика получения культуры ткани хорошо разработана и обычно не вызывает
вопросов. Чтобы получить культуру ткани, из любой части растения вычленяют
эксплант (кусочек ткани размером 0,5—1,0 см, из образовавшегося каллуса для
пересева размером 2—4 мм) и помещают на питательную среду (табл. 1, рис. 2).
Состав среды, в мг/л (Т. Мурасиге и Ф. Скуг, 1962)
Таблица 1
№ п/п Название вещества Концентрация, мг/л Компонент среды
1 KNO 3 1900,0 Макроэлементы
2 NH 4 NO 3 1650,0
3 CaCl 2 2H 2 O 440,0
4 MgSO 4 7H 2 O 370,0
5 KH 2 PO 4 170,0
6 Na 2 ЭДТА 2H 2 O 37,3 Микроэлементы
7 FeSO 4 7H 2 O 27,2
8 MnSO 4 7H 2 O 22,3
9 ZnSO 4 7H 2 O 8,6
10 H 3 BO 3 6,2
11 KI 0,83
12 Na 2 MoO 4 2H 2 O 0,25
13 CuSO 4 5H 2 O 0,025
14 CoCl 2 6H 2 O 0,025
15 Мезоинозит 100,0
16 Никотиновая кислота 0,5 Витамины
17 Пиридоксин Hl 0,5
18 Тиамин Hl 0,1
19 -индолилуксусная кислота 2,0 Фитогормоны
20 Кинетин 0,2
21 Глицин 2,0 Аминокислота
22 Сахароза 30000,0 Углевод
23 Агар 30000,0 Отвердитель среды
Ткани, культивируемые in vitro, перед помещением на питательную среду
должны быть стерильными. Стерилизуются исходные кусочки ткани растений,
питательная среда; асептически в специальных боксах стерильным инструментом
проводятся манипуляции с выращиванием объектов. Чашки Петри, пробир-