ÐинÑк: ÐÐУ, 2011. - ÐÐУ. Ð¡Ð°Ð¹Ñ Ð±Ð¸Ð¾Ð»Ð¾Ð³Ð¸ÑеÑкого ÑакÑлÑÑеÑа
ÐинÑк: ÐÐУ, 2011. - ÐÐУ. Ð¡Ð°Ð¹Ñ Ð±Ð¸Ð¾Ð»Ð¾Ð³Ð¸ÑеÑкого ÑакÑлÑÑеÑа
ÐинÑк: ÐÐУ, 2011. - ÐÐУ. Ð¡Ð°Ð¹Ñ Ð±Ð¸Ð¾Ð»Ð¾Ð³Ð¸ÑеÑкого ÑакÑлÑÑеÑа
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
Êóëüòóðà òêàíåé è êëåòîê ËÐ — íîâûé èñòî÷íèê ïîëó÷åíèÿ ËÐÑ 49<br />
(компоненты стенок грибного мицелия или какие-либо другие продукты жизнедеятельности<br />
микроорганизмов) интенсивность синтеза клетками растений некоторых<br />
фармакологически ценных веществ возрастает. Поэтому Институт биотехнологии<br />
(г. Саскачеван, Канада) в целях уменьшения себестоимости конечного<br />
продукта предложил промышленный способ получения сангвинарина из клеточных<br />
культур мака путем элиситации алкалоида гомогенатом из мицелия гриба<br />
питиум (Pythium aphanidermatum (Edson.) Fitzp.).<br />
Кроме элиситоров грибного и микробного происхождения биосинтез вторичных<br />
продуктов могут стимулировать химические вещества. Так, сульфат ванадия<br />
способствовал увеличению почти в 2 раза содержания индольных алкалоидов<br />
аймалицина и катарантина в культивируемых клетках барвинка розового (Vinca<br />
rosea L.). В настоящее время не известен ни механизм воздействия VaSO 4 на синтез<br />
вторичных продуктов, ни место его аккумуляции. Тем не менее обработка клеток<br />
ванадием способствовала сокращению периода роста, увеличению выхода<br />
индольных алкалоидов и, в отличие от грибных элиситоров, не требовала выращивания<br />
грибов и получения из них элиситора.<br />
Способы выращивания. В большинстве микробных систем продукты, синтезируемые<br />
микроорганизмами, продуцируются из клетки непосредственно в среду,<br />
в связи с чем эффект обратного ингибирования продуктом реакции очень мал.<br />
В культуре ткани, как правило, при увеличении концентрации продукта в клетке<br />
выше пороговой, срабатывает эффект обратного ингибирования, вследствие чего<br />
дальнейшее накопление вещества прекращается. Данное явление часто обусловливает<br />
низкое содержание искомых веществ в клетках культуры. Чтобы избежать этого<br />
эффекта, исследователи неоднократно предпринимали попытки удалить продукт<br />
реакции из клетки по мере его синтеза. Так, для увеличения проницаемости<br />
клеток хинного дерева (Cinchona ledgeriana Moens ex Trimen) в культуре и ускорения<br />
выхода внутриклеточных алкалоидов применяли диметилсульфоксид. Однако<br />
даже при высокой концентрации сурфактанта высвобождение алкалоидов протекало<br />
медленно, и большинство обработанных мембран не восстанавливалось.<br />
Для некоторых суспензионных культур весьма экономичным оказался способ<br />
выращивания в виде двухфазной системы: водной фазы (питательная среда с<br />
растущими клетками) и нетоксичной липофильной фазы (триглицериды или парафины).<br />
В результате липофильные вещества, синтезируемые клетками в процессе<br />
их роста, переходят в липофильную фазу. Например, суспензионная культура<br />
ромашки росла в двухфазной системе, состоящей из водного раствора питательной<br />
среды и нетоксичной липофильной фазы (триглицерид миглиол) в течение<br />
22 дней. В результате жирорастворимые продукты, синтезируемые культурой<br />
ткани ромашки, накапливались в фазе миглиола в 60 раз большей концентрации,<br />
чем в однофазной системе.<br />
Клеточная дифференциация in vitro. В настоящее время большое число экспериментальных<br />
данных свидетельствует о том, что образование и накопление вторичных<br />
продуктов в растениях — сложный, пространственно организованный<br />
процесс, который часто в той или иной форме включает транспортировку этих соединений<br />
на клеточном и субклеточном уровнях. В ряде случаев показано резкое<br />
разграничение мест первичного синтеза и накопления алкалоидов. Установлено,<br />
что эти процессы могут быть локализованы в пределах одного и того же органа или