"Chronopsychobiologischen Regulationsdiagnostik" (CRD)

LITERATUR 25
Kotproben können auch von nicht an den Menschen gewöhnten Tieren nicht-invasiv
entnommen werden. Die Konzentrationen der Cortisolmetaboliten im Kot spiegeln die
Verlaufskurve der Konzentrationen im Blut wider. Die episodischen Schwankungen
des Cortisolspiegels im Blut werden allerdings im Kot um den Faktor 5-10 geglättet
(PALME U. MÖSTEL 2000). Die Ausscheidung ist beim Pferd durch die
Darmpassagezeit um 24 Stunden verzögert.
2.3.5 Methode der Bestimmung von Cortisol im Speichel
Je nach Studie wurden verschiedene Methoden der Speichelgewinnung und
Auswertung angewandt. Zwischen unterschiedlichen Messmethoden sollten keine
absoluten Cortisolvergleiche vorgenommen werden (GRANDIN 1997, VAN DER KOLK ET
AL. 2001). Speichelproben werden mit unterschiedlichem Tupfermaterial gewonnen.
Bei Untersuchungen am Menschen (GRANGER ET AL. 2007) hat sich gezeigt, dass
Baumwolle nicht geeignet ist für Proben mit kleinen Volumina. Wenn die Oberfläche
der Baumwolle im Vergleich zum Probenvolumen relativ groß ist, ist die
Wiederfindungsrate schlecht. GRANGER ET AL. (2007) gewinnen bei 0,25 ml Speichel
nur 38,3 %, bei 1,5 ml hingegen aber 82,5 % Speichelflüssigkeit wieder aus dem
Tupfer. Es empfiehlt sich kein Baumwollmaterial bei einem Probenvolumen unter
200 µl zu verwenden. Baumwolle bewirkt einen Filtereffekt: indem sie
Wassermoleküle abfängt, wird der Speichel konzentriert. Außerdem werden größere
Moleküle wie zum Beispiel Ig A zurückgehalten. Eine bessere Wiederfindungsrate,
auch bei Volumina unter 100 µl, erzielten GRANGER ET AL. (2007) mit einem
Hydrocelluloseschwamm.
DRECHSEL UND GRANGER (2009) haben beim Hund den Einsatz von Zitronensäure
untersucht. Zitronensäure soll den Speichelfluss anregen und zu höheren
Probenvolumina führen. Bei in-vitro-Versuchen mit > 0,001 g Zitronensäure/ml
Speichel wurde das Messergebnis bei der Auswertung im Immunoassay verfälscht.
Ein saurer pH-Wert führt in Immunoassays zu falsch hohen Cortisolwerten. Bei dem
Einsatz von Zitronensäure in vivo blieb der pH-Wert im Speichel allerdings konstant,
weil die Pufferkapazität ausreichend war. Somit kam es nicht zu Verfälschungen der
Messergebnisse. Allerdings konnte durch den Einsatz von Zitronensäure kein