The effects of activated carbon and plants diversity ... - 华南农业大学

华 南 农 业 大 学 农 学 院 第 三 届 综 述 大 赛 获 奖 作 品 论 文 集二 等 奖 作 品Number of Tandem Repeats,VNTR) 又 称 小 卫 星 DNA (Minisatellite DNA) 及 代 表 性 分 子 标记 技 术 : 限 制 性 长 度 多 态 性 (Restriction Fragment Length Polymorphism ,RFLP)。第 二 类 是 以 PCR 技 术 为 核 心 的 分 子 标 记 技 术 , 这 类 分 子 标 记 技 术 种 类 最 多 , 应 用 最为 广 泛 。 其 中 又 分 为 两 种 : 第 一 种 是 随 机 引 物 的 PCR 标 记 , 以 随 机 扩 增 多 态 性 (RandomAmplified Polymorphism DNA ,RAPD) 的 代 表 技 术 , 包 括 DNA 扩 增 指 纹 印 迹 (DNAAmplification Fingerprinting,DAF) 、 任 意 引 物 PCR(Arbitrarily Primed Polymerase ChainReaction,AP—PCR); 第 二 种 是 特 异 引 物 的 PCR 标 记 , 代 表 性 技 术 是 简 单 重 复 序 列 (SimpleSequence Repeat,SSR) 及 ISSR 标 记 (inter-simple sequence repeats), 包 括 序 列 特 异 性 扩增 区 (Sequence—characterized Amplified Region,SCAR)、 包 括 序 列 标 志 位 点 (SequenceTagged Sites , STS) 、 相 关 序 列 扩 增 多 态 性 (Sequence-related amplified polymorphism,SRAP)、 单 引 物 扩 增 反 应 (Single Primer Amplificatipn Reaction,SPAR)、ISTR ( InverseSequence—tagged Repeat) 技 术 、 双 脱 氧 化 指 纹 法 (Dideoxy Fingerprints,ddF)、DNA 单 链构 象 多 态 性 (Single Strand Conformation Polymorphism,SSCP) 等 等 。第 三 类 是 基 于 限 制 性 酶 切 和 PCR 技 术 的 DNA 标 记 , 以 扩 增 片 段 长 度 多 态 性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP) 为 代 表 技 术 , 还 有 酶 切 扩 增 多 态 性 序 列(Cleaved Amplified Polymorphism Sequences,CAPS)。第 四 类 是 基 于 DNA 芯 片 技 术 的 分 子 标 记 技 术 , 也 就 是 现 在 被 称 为 第 三 代 分 子 标 记 技术 , 目 前 只 有 核 苷 酸 多 态 性 (Single Nucleotide Polymorphism,SNP) 一 种 。2 DNA 分 子 标 记 技 术 在 烟 草 遗 传 育 种 的 应 用2.1 烟 草 分 类 及 遗 传 多 样 性 研 究分 子 标 记 技 术 不 受 环 境 、 季 节 的 影 响 , 与 形 态 标 记 和 同 功 酶 标 记 相 比 , 更 适 合 用 于[5]植 物 分 类 和 遗 传 多 样 性 研 究 。 徐 明 辉 等 (1988) 利 用 235 对 随 机 引 物 对 来 源 于 中 国 , 美国 等 国 家 的 23 个 烤 烟 和 地 方 晒 晾 烟 品 种 基 因 组 DNA 进 行 RAPD 分 析 , 将 23 个 品 种 划 分 为 6[6]类 。 何 川 生 等 (2000) 以 31 个 优 良 烤 烟 品 种 为 材 料 进 行 RAPD 扩 增 , 探 索 利 用 RAPD 标[7]记 鉴 定 烤 烟 品 种 和 纯 度 分 析 的 可 能 性 。 肖 炳 光 等 (2000) 利 用 100 个 RAPD 标 记 对 29 个 烤 烟品 种 进 行 了 分 子 指 纹 图 谱 的 构 建 , 研 究 分 析 将 这 29 个 品 种 分 为 三 个 类 群 并 得 出 了 遗 传 距[8]离 狭 窄 的 结 论 。 杨 本 超 等 (2005) 利 用 100 个 ISSR 标 记 对 24 份 具 有 代 表 性 的 烤 烟 种 质 进行 了 遗 传 多 样 性 分 析 。 研 究 表 明 其 遗 传 多 样 性 较 低 , 品 种 间 遗 传 相 似 指 数 (GS) 为 0.66~[9]0.85。 杨 友 才 (2005) 分 别 用 RAPD 和 AFLP 标 记 分 析 了 烟 草 种 质 资 源 的 遗 传 多 样 性 , 两[10]者 都 将 48 份 烟 草 资 源 分 为 两 大 类 群 , 遗 传 距 离 在 1.41~11.0 之 间 。 杜 传 印 等 (2006) 利用 AFLP 荧 光 标 记 技 术 , 筛 选 出 8 对 引 物 对 烟 草 7 种 类 型 90 份 种 质 进 行 扩 增 分 析 ,90 份 烟 草种 质 的 Dice 遗 传 相 似 系 数 0.33~0.89 之 间 , 平 均 为 0.66, 表 明 烟 草 种 质 的 遗 传 相 似 程 度 较[11]高 , 亲 缘 关 系 较 近 。 杨 友 才 等 (2006) 选 用 4 对 AFLP 选 择 性 扩 增 引 物 对 48 份 烟 草 材料 的 基 因 组 DNA 进 行 选 择 性 扩 增 , 将 48 份 烟 草 资 源 分 为 两 大 类 群 ,48 份 材 料 的 遗 传 距[12]离 变 幅 在 1.41~11.0 之 间 。 杜 传 印 等 (2006) 利 用 AFLP 技 术 , 对 48 份 不 同 类 型 和 地 域93