01990R2676-20050813 - EUR-Lex

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4.2. Preparazione della colonna a scambiatore ionico
Porre nella colonna di vetro 11 × 300 mm, al di sopra del rubinetto, un
tampone di lana di vetro. Versare nella colonna lo scambiatore di ioni
preparato come descritto in 4.1 per un'altezza di 10 cm. Con il
rubinetto aperto lasciare percolare la soluzione di acido acetico al 30
% sino a circa 2-3 mm al di sopra della superficie della resina.
Lavare quindi con 50 ml della soluzione di acido acetico allo 0,5 %.
4.3. Isolamento dell'acido DL-malico
Versare sulla resina preparata come descritto in 4.2 10 ml di vino o di
mosto.
Lasciare percolare il vino, goccia a goccia (una goccia al secondo
circa), sino a circa 2-3 mm al di sopra della superficie della resina.
Lavare la colonna prima con 50 ml circa della soluzione di acido
acetico allo 0,5 % e dopo con circa 50 ml di acqua distillata; lasciare
percolare queste soluzioni con la stessa velocità del vino.
Eluire gli acidi fissati sulla resina a scambio ionico per mezzo della
soluzione di solfato di sodio al 10 % con la stessa velocità delle
operazioni precedenti (1 goccia al secondo), raccogliere l'eluato in un
pallone tarato da 100 ml sino al segno di taratura.
La resina può essere rigenerata come descritto in 4.1.
4.4. Dosaggio dell'acido malico
In due provette a tappo smerigliato, a bocca larga, da 30 ml, «A» e
«B», introdurre 1,0 ml di eluato e 1,0 ml della soluzione di acido
cromotropico al 5 %. Nella provetta «A» aggiungere 10,0 ml di acido
solforico all'86 % (bianco) e nella provetta «B» 10,0 ml di acido
solforico al 96 % (campione). Tappare ed agitare per ottenere una
perfetta omogeneità senza bagnare la parte smerigliata. Porre le due
provette per 10 minuti esatti nel bagno maria portato preventivamente
a ebollizione vivace. Far raffreddare le provette a 20 °C al buio.
Esattamente dopo 90 minuti dall'inizio del raffreddamento misurare
l'assorbanza della provetta «B» contro il bianco (provetta «A») alla
lunghezza d'onda di 420 nm nelle celle da 10 mm di cammino ottico.
4.5. Curva di taratura
In palloncini tarati da 50 ml versare 5 - 10 - 15 e 20 ml della soluzione
di acido malico di 0,5 g/l; portare a segno con la soluzione di solfato
di sodio al 10 %.
Le soluzioni così ottenute corrispondono ad eluati ottenuti a partire da
vini contenenti 0,5 - 1,0 - 1,5 e 2,0 g di acido DL-malico per litro.
Continuare come indicato in 4.4.
I valori dell'assorbanza ottenuti con queste soluzioni, riportati in
funzione dei tenori in acido malico corrispondenti, si allineano su una
retta passante per l'origine.
Poiché l'intensità della colorazione è notevolmente influenzata dalla
concentrazione dell'acido solforico, è necessario controllare la curva
di taratura per almeno un punto per ogni serie di misure per mettere
in evidenza una eventuale variazione della concentrazione dell'acido
solforico.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
Riportare l'assorbanza misurata per l'eluato sulla curva di taratura per
ottenere il tenore in acido DL-malico in grammi per litro con une
divra decimale.
Ripetibilità
tenore < 2 g/l: r = 0,1 g/l
tenore > 2 g/l: r = 0,2 g/l
Riproducibilità
R = 0,3 g/l
1990R2676 — IT — 13.08.2005 — 011.001 — 118