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Ambos métodos físicos e químicos possuem suas vantagens e desvantagens que dependem de vários fatores. Em geral, os métodos de imobilização química tendem a reduzir a atividade da enzima, onde as ligações covalentes podem perturbar a estrutura tridimensional da enzima nativa. No entanto, essas ligações covalentes promovem uma forte e estável ligação entre a enzima e o suporte, onde, em alguns casos, pode alterar a especificidade da enzima. Os e métodos de imobilização física perturbam a enzima menos e conseqüentemente causam menor alteração das propriedades da mesma. Dessa forma, a escolha entre os métodos físicos e químicos depende de vários fatores. Usualmente, é preferível obter uma enzima com menor atividade, mas com maior estabilidade do que uma enzima com uma alta atividade, mas que possui uma pequena estabilidade (DURÁN et al., 2002). MATRIZ MICROCÁPSULAS MÉTODOS PARA IMOBILIZAÇÃO DAS ENZIMAS FÍSICOS MEMBRANAS MACROSCÓPICAS MICELAS REVERSAS LIGAÇÃO IÔNICA QUÍMICOS LIGAÇÃO DA ENZIMA NO SUPORTE ATRAVÉS DE REAGENTES BIFUNCIONAIS LIGAÇÃO COVALENTE LIGAÇÃO CRUZADA ENTRE A ENZIMA E O SUPORTE Figura 8: Métodos mais comuns utilizados para a imobilização de enzimas (Fonte: htpp://www.cape.canterbury.ac.nz/Archive/IMMOB/immob.htm). LIGAÇÃO DA ENZIMA NO SUPORTE POR LIGAÇÕES COVALENTES 40
Vários tipos de suportes vêm sendo estudados para a imobilização das lacases, dentre eles encontram-se: vidro poroso, gel de alginato, gel de poliacrilamida, vitrocerâmicos, grafite, alumina, membrana de nylon, membrana de teflon, poliuretano, platina, quitina, quitosana e outros (DURÁN et al., 2002). 2.7-QUITINA E QUITOSANA A quitina, denominação usual para o polímero β-(1-4) 2-acetamido-2-deoxi-D-glicose (N-acetilglicosamina) (Figura. 9), é o precursor direto da quitosana e foi descoberta em cogumelos pelo professor francês Henri Braconnot, em 1811, recebendo então a denominação inicial de fungina. O nome quitina foi dado por Odier, em 1823, quando esta foi isolada de insetos. Figura 9: Representação da estrutura química da quitina. A quitina é um polímero constituído por uma seqüência linear de açúcares monoméricos β-(1→4)-2-acetoamido-2-deoxi-D-glicose ou (N-acetilglicosamina) possuindo, assim, estrutura semelhante à fibra vegetal denominada celulose (Figura 1). A diferença estrutural entre as duas fibras deve-se aos grupos hidroxilas localizados na posição 2, que na quitina foram substituídos por grupos acetoamino, sendo a mais abundante fibra de ocorrência 41
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