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3.0-MATERIAIS E MÉTODOS
PARTE 1: IMOBILIZAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DA LACASE
3.1-MATERIAIS
A quitosana e a enzima lacase de Aspergillus sp (DeniliteTM II Base) foram doadas
respectivamente pelo Laboratório QUITECH - Departamento de Química (UFSC) e
Novozymes. A siringaldazina foi adquirida junto a Sigma e o glutaraldeído 25% da Vetec.
3.2-CARACTERIZAÇÃO DA QUITOSANA
A amostra de quitosana foi caracterizada por determinação do grau de desacetilação
(GD), massa molar média (MMm), área superficial e análise por espectro de infravermelho.
3.2.1-DETERMINAÇÃO DO GRAU DE DESACETILAÇÃO (GD)
Para a quantificação dos grupamentos amino presentes na estrutura da quitosana, foi
realizada uma titulação potenciométrica, onde uma solução de 0,2 g de quitosana diluída em
20 mL de ácido clorídrico 0,3 M e 200 mL de água destilada foi titulada com uma solução de
NaOH 0,2 M. Foram adicionadas alíquotas de 0,5 mL da solução titulante até seu volume
final de 80 mL. A porcentagem dos grupamentos amino foi calculada de acordo com a
equação (1):
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