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Além disso, observou-se que o aumento da porcentagem de glutaraldeído foi
inversamente proporcional à atividade enzimática das esferas. Esse resultado difere do obtido
no estudo realizado por Jiang e colaboradores (2005) que também realizaram a otimização da
porcentagem de glutaraldeído a ser utilizada para ativar microesferas magnéticas de
quitosana, mas observaram que as mesmas ativadas com solução 8% de glutaraldeído
detinham os maiores valores de atividade. Entretanto, vale ressaltar que os autores utilizaram
partículas de óxido de ferro durante o processo de fabricação das esferas, o que possivelmente
tenha ocasionado a diferença observada entre os resultados obtidos.
De forma geral, foi possível verificar através das figuras 18, 19 e 20, que as esferas
ativadas com maior porcentagem de glutaraldeído (≥3%), possuíram maior quantidade de
moléculas de proteínas acopladas e possivelmente maior quantidade de moléculas de enzima
imobilizadas em sua superfície. Entretanto, quanto maior a porcentagem desse acoplamento,
menor foi o valor de atividade enzimática, devido, possivelmente, aos processos comentados
no item 4.4.
Para finalmente determinar qual a porcentagem de glutaraldeído fornece a quantia
ideal de grupos aldeídos para imobilizar a enzima, foram analisada a estabilidade térmica
(Figura 21), estabilidade frente a pH alcalino (Figura 22) e estabilidade durante um período de
estocagem das esferas de quitosana ativadas com soluções de diferentes porcentagens de
glutaraldeído (Figura 23).
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