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3.4.9-DETERMINAÇÃO DE ESTABILIDADE FRENTE À ESTOCAGEM
As enzimas livre e imobilizada foram submetidas a um teste de estabilidade durante
um período de estocagem de 10 dias a temperatura de 25 o C em água ultrapura, onde a
atividade enzimática (item 3.4.2) residual foi determinada (equação 13).
3.4.10-EFEITO DO USO REPETIDO SOBRE A ATIVIDADE RESIDUAL DA ENZIMA IMOBILIZADA
As esferas contendo a enzima imobilizada foram adicionadas em uma cubeta de vidro
(3 mL) juntamente à 1 mL de tampão tartarato pH=4,0 e 25 μL de siringaldazina. Após
completa oxidação do substrato (item 3.4.2), as esferas foram lavadas com água destilada e o
mesmo procedimento foi repetido cinco vezes. Dessa forma, a possibilidade de reuso da
enzima imobilizada nas esferas de quitosana foi determinada através das medidas de atividade
enzimática (equação 13) residual em cinco ciclos consecutivos de oxidação da siringaldazina.
3.5-OTIMIZAÇÃO DO PROCESSO DE IMOBILIZAÇÃO
3.5.1-OTIMIZAÇÃO DO TEMPO NECESSÁRIO PARA PROMOVER A IMOBILIZAÇÃO DA ENZIMA
As esferas de quitosana previamente ativadas como discutido no item 3.3.2, foram
incubadas com 10 mL de solução enzimática 0,5 g/L. O conjunto foi submetido à leve
agitação, onde alíquotas de sobrenadante foram retiradas em 0, 1, 2, 3, 4 e 5 horas para a
determinação de atividade enzimática (item 3.4.2) e proteínas totais (3.5.1.1). Após a
determinação da atividade enzimática e proteínas totais, foi possível calcular a porcentagem
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