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de proteína acoplada utilizando a equação (14) (HUNG, CHIOU, WU, 2003) e o rendimento
de imobilização utilizando a equação (15):
quantidade proteína acoplada
(14) % proteína acoplada = (100)
quantidade proteína introduzida
Ufs
Uis
(15) % rendimento de imobilização = ( 100)
Onde: Usf= atividade enzimática do sobrenadante após o período de incubação e Uis=
atividade enzimática do sobrenadante antes do período de incubação.
3.5.1.1-DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNAS TOTAIS
A concentração de proteínas foi determinada com o auxílio de um espectrofotômetro a
595 nm com Coomassie Blue (BRADFORD, 1976). O conteúdo de proteína foi calibrado
com soluções de albumina bovina, de concentrações que variaram de 0 a 50 μg/μL. O
coeficiente de regressão linear (r 2 ) foi de 0,9861, conforme ilustrado no anexo A.
3.5.2-OTIMIZAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE GLUTARALDEÍDO PARA PROMOVER A ATIVAÇÃO
DAS ESFERAS
O objetivo desse experimento foi avaliar qual a concentração de glutaraldeído que
favorece de forma mais eficiente a imobilização enzimática, e verificar qual das diferentes
concentrações de glutaraldeído utilizadas para ativar as esferas, dá origem a enzima que
adquire maior estabilidade frente a diferentes temperaturas, após 30 minutos (3.4.6), pH
alcalino (3.4.7) e um período de estocagem de 10 dias (3.4.9).
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