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crescente para os substratos: vermelho de fenol> siringaldazina> ABTS que possuem
respectivamente MM de 354/ 360 e 548 g/mol. É relevante esclarecer que, além das
características dos substratos, outros eventos podem contribuir para o aumento do valor de
Km e Vmáx, como: a) perda de flexibilidade da enzima necessária para a ligação com o
substrato (ZANIN e MORAES, 2004); b) limitação da difusão do substrato e produtos devido
à natureza não porosa do suporte (CETINUS e ÖZTOP, 2003); c) formação de uma camada
de solvente ao redor da esfera (camada de Nernst), que pode conter concentração de substrato
menor em relação à solução (CRESSEWLL e SANDERSON, 1970);
4.5.3-ESTABILIDADE FRENTE A INIBIDORES
Os efeitos de vários inibidores sobre a lacase livre e imobilizada foram investigados.
Os resultados (Figura 26) demonstram que EDTA, K2Cr2O7 e KFe(CN)6 não provocaram
inibição enzimática nas concentrações estudadas. Dentro deste contexto, o trabalho de
Rogalski e colaboradores (1995) ilustra uma comparação entre as lacases de Plebia radiata e
Cerrena versicolor com relação ao efeito inibitório de agentes quelantes. Esses autores
observaram que a lacase de P. radiata foi mais resistente à inibição devido ao menor
conteúdo de átomos de Cu no centro catalítico. Outro estudo também ilustrou que o EDTA
não provocou inibição sobre lacase de Cerrena unicolor (Rogalski et al., 1999). Dessa forma,
é possível supor que a lacase utilizada neste trabalho deve possuir um número reduzido de
átomos de Cu, o que explica sua menor susceptibilidade à inibição pelo EDTA. No caso do
H2O2 e NaN3, mostraram-se potentes inibidores. Considerando isso, para avaliar se a
imobilização foi capaz de tornar a enzima menos vulnerável frente a tais inibidores, foram
realizados experimentos de determinação de atividade da enzima livre e imobilizada com os
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