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enzima, proporcionando a mesma uma melhor estabilidade frente a fatores físicos e químicos
como: elevada temperatura, pH muito alcalino e tempo de armazenamento (itens 4.4.6; 4.4.7;
4.4.9).
Conforme citado no item 4.3.2, o processo de ativação das esferas com as soluções de
glutaraldeído foi realizado em pH=8,0, pois durante o processo de entrecruzamento, o grupo
aldeído reage com grupo amino da quitosana para formar o grupo imino (CH=N) (Esquema
2). A formação do grupo imino ocorre preferencialmente em pH alcalino, onde os grupos
amino encontram-se desprotonados. Neste caso, a formação desse grupo deve ocorrer
preferencialmente em pH≥8,0, conforme ilustrado no item 4.1.1, onde os grupos amino do
polímero devem estar completamente desprotonados. O grupo amino desprotonado é um
nucleófilo mais eficiente que o mesmo na forma protonada, devido ao menor
compartilhamento do par de elétrons do nitrogênio. O mecanismo da reação de formação do
grupo imino pode ser visualizado no Esquema 3 (MORRISON e BOYD, 1996).
O H
H
Glutaraldeído
OH
H
H
Glutaraldeído
H
O
N
C
H
( CH2)3
C
N
Lacase
H
HO
O
H OH
H
H
N
C H
Esquema 2: Ilustração esquemática da enzima imobilizada sobre o suporte (esferas de quitosana) com
auxílio do agente bifuncional (glutaraldeído) (JIANG et al., 2005).
H
Lacase
H
N
C
( CH 2) 3
O
O
Quitosana
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