(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel
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[0325]<br />
[0326]<br />
[0327]<br />
[0328]<br />
(Matsushita, M., et al., J. Immunol. 164:2281, 2000). 따라서, 본 발명에 사용되는 MASP-2 억제 펩티드는<br />
MBL 단백질 (SEQ ID NO:21), H-피콜린 단백질 (Genbank accession number NM_173452), M-피콜린 단백질<br />
(Genbank accession number 000602) 및 L-피콜린 단백질 (Genbank accession number NM_015838)에서 선택된<br />
최소한 5개의 아미노산의 영역을 포함한다.<br />
더 특이적으로, 과학자들은 MBL상의 MASP-2 결합 부위는 MBP의 콜라겐-유사 도메인의 C-말단 부분의 힌지 및<br />
넥 사이에 있는 <strong>12</strong>개의 GIy-X-Y 트리플렛 "GKD GRD GTK GEK GEP GQG LRG LQG POG KLG POG NOG PSG SOG PKG<br />
QKG DOG KS" (SEQ ID NO:26) 내에서 확인되었다 (Wallis, R., et al., J. Biol. Chem. 279:14065, 2004). 이<br />
MASP-2 결합 부위 영역은 인간 H-피콜린 및 인간 L-피콜린 내에서 고도로 전환되었다. 컨센서스 결합 부위는<br />
아미노산 서열 "OGK-X-GP" (SEQ ID NO:22)를 포함하는 모든 3개의 렉틴 단백질 내에 존재하며, 여기서 문자<br />
"O"는 히드록시프롤린을 나타내며 문자 "X"는 소수성 잔기이다 (Wallis et al., 2004, supra). 따라서, 일 실<br />
시형태에서, 본 발명에 유용한 MASP-2 억제 펩티드는 최소한 6개의 아미노산 길이이며, SEQ ID NO:22를 포함<br />
한다. 아미노산 서열 "GLR GLQ GPO GKL GPO G" (SEQ ID NO:24)를 포함하는 MBL에서 유도된 펩티드는 시험관<br />
내에서 MASP-2와 결합하는 것으로 나타났다 (Wallis, et al., 2004, supra). MASP-2의 결합을 증진시키기 위<br />
하여, 펩티드는 천연 MBL 단백질 내에서 발견되는 삼중나선의 형성을 증진하기 위하여 각 말단에 두 GPO 트리<br />
플렛에 의하여 측면보호되도록 합성될 수 있다 ("GPO GPO GLR GLQ GPO GKL GPO GGP OGP O" SEQ ID NO:25)<br />
(Wallis, R., et al., J. Biol. Chem. 279:14065, 2004).<br />
MASP-2 억제 펩티드는 H-피콜린 내의 컨센서스 MASP-2 결합 영역으로부터 서열 "GAO GSO GEK GAO GPQ GPO GPO<br />
GKM GPK GEO GDO" (SEQ ID NO:27)를 포함하는 인간 H-피콜린으로부터 유도될 수 있다. L-피콜린 내의 컨센서<br />
스 MASP-2 결합 영역으로부터 서열 "GCO GLO GAO GDK GEA GTN G<strong>KR</strong> GER GPO GPO GKA GPO GPN GAO GEO" (SEQ ID<br />
NO:28)를 포함하는 인간 L-피콜린으로부터 유도된 펩티드를 포함한다.<br />
MASP-2 억제 펩티드는 C4 분열 부위는 예컨대 항트롬빈III의 C-말단 부분에 링크된 C4 분열 부위인<br />
"LQRALEILPNRVTIKANRPFLVFI" (SEQ ID NO:29)로부터 유도될 수 있다 (Glover, G. L, et al., Mol. Immunol.<br />
25:<strong>12</strong>61 (<strong>19</strong>88)).<br />
표 3<br />
표 3: 예시적인 MASP-2 억제 펩티드<br />
SEQ ID NO 공급원<br />
SEQ ID NO: 6 인간 MASP-2 단백질<br />
SEQ ID NO: 8 MASP-2의 CUBI 도메인<br />
(aa 1-<strong>12</strong>1의 SEQ ID NO: 6)<br />
SEQ ID NO: 9 MASP-2의 CUBIEGF 도메인<br />
(aa 1-166의 SEQ ID NO: 6)<br />
SEQ ID NO: 10 MASP-2의 CUBIEGFCUBII 도메인<br />
(aa 1-293의 SEQ ID NO: 6)<br />
SEQ ID NO: 11 MASP-2의 EGF 도메인 (aa <strong>12</strong>2-166)<br />
SEQ ID NO: <strong>12</strong> MASP-2의 세린-프로테아제 도메인<br />
SEQ ID NO: 16<br />
(aa 429-671)<br />
MASP-2 내의 MBL 결합 영역<br />
SEQ ID NO: 3 인간 MAp<strong>19</strong><br />
SEQ ID NO: 21 인간 MBL 단백질<br />
SEQ ID NO: 22<br />
인간 MBL 및 인간 피콜린의 합성 펩티드 컨센서스<br />
OGK-X-GP,<br />
결합 부위<br />
여기서 "O" =<br />
하이드록시프롤린미며 "x"는 소수성 아미노산 잔<br />
기이다<br />
SEQ ID NO: 23<br />
인간 MBL 코어 결합 부위<br />
OGKLG<br />
SEQ ID NO: 24<br />
G<strong>KR</strong> GLQ GPO GKL GPO G<br />
SEQ ID NO: 25<br />
GPOGPOGLRGLQGPO<br />
GKLGPOGGPOGPO<br />
- 51 -<br />
인간 MBL 트리플렛 6-10-입증 결합 MASP-2<br />
삼중 나선의 형성을 강화하도록 첨가된<br />
GPO를 지닌 인간 MBL 트리플렛<br />
공개특허 10-20<strong>12</strong>-0099680
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