(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

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청에서 관찰된 C4 침착의 감소는 MBL-MASP 복합체내의 MASP-2 결핍에 의하여 유발되어야한다 (도 22b). 따라
서, MASP-2가 MBL-MASP 복합체에 의한 C4의 활성화에 필수적인 것이 분명하다. 그러나, rMASP-2의 첨가는 분
열 활성을 완전하게 복구하지 못하며, C4 침착은 고점에 이른다. 전술한 바와 같이 (Cseh et al, J Immunol
169: 5735-5743 (2002); Iwaki and Fujita, J Endotoxin Res 11: 47-50 (2005)), 대부분의 rMASP-2는 정제 절
차 도중 자가활성화에 의하여 활성형태로 전환되며, 일부는 이들의 프로테아제 활성을 상실한다. 활성 또는
불활성 상태의 MASP-2는 이들의 MBL 결합에 현저한 영향을 주지 못하기 때문에 (Zundel et al, J Immunol
172: 4342-4350 (2004)), 이들의 프로테아제 활성을 상실한 rMASP-2가 MBL에 결합하고, 경쟁적으로 활성 형태
의 결합을 막는 것이 가능하며, 따라서 C4 침착의 불완전 복구가 된다. 렉틴 경로의 C3 분열 활성 결핍 혈청
내에서 감소된다 (도 23b). 침착된 C3의 양의 감소는 아마도 매우 낮은 수준의 C3 전환효소 활성에 기인하며,
MASP-2에 의하여 생성된 C4b 및 C2a 단편으로 구성되어 있다.
동종이량체로서 MASP와 sMAP는 결합되며 이들의 N-말단 CUB 및 EGF-유사 도메인을 통하여 MBL 또는 L-피콜린
과의 복합체를 형성한다 (Chen and Wallis, J Biol Chem 276: 25894-25902 (2001); Cseh et al, J Immunol
169: 5735-5743 (2002); Thielens et al, J Immunol 166: 5068-5077 (2001); Zundel et al, J Immunol 172:
4342-4350 (2004)). sMAP 및 MASP-2의 CUBI-EGF-CUB2 부분의 결정구조는 이들의 동종이량체 구조를 알려준다
(Feinberg et al, EMBO J 22: 2348-2359 (2003); Gregory et al, J Biol Chem 278: 32157-32164 (2003)). MBL
의 콜라겐-유사 도메인은 MASP의 결합에 관여한다 (Wallis and Cheng, J Immunol 163: 4953-4959 (1999);
Wallis and Drickamer, J Biol Chem 279: 14065-14073 (1999), 도메인에 도입된 일부 돌연변이는 MBL의 MASP-
1 및 MASP-2의 CUBI-EGF-CUB2 부분에 대한 결합을 감소시킨다 (Wallis and Dodd, J Biol Chem 275: 30962-
30969 (2000)). MASP-2 및 MASP-1/3의 결합 부위는 오버랩되나 일치하지는 않는다 (Wallis et al, J Biol
Chem 279: 14065-13073 (2004)). MBL의 sMAP-결합 부위는 확인되지 않았으나, sMAP 및 MASP-2의 결합 부위는
아마도 동일한 것 같으며, 이는 CUBI-EGF 영역이 sMAP 및 MASP-2 내에서 동일하기 때문이다. 따라서, sMAP 및
MASP-2가 서로 경쟁하여 MBL-MASP-sMAP 복합체의 재구성에서 MBL에 결합하는 것이 당연하다 (도 24). sMAP의
MBL에 대한 친화도는 MASP-2 보다 낮다 (Cseh et al, J Immunol 169: 5735-5743 (2002); Thielens et al, J
Immunol 166: 5068-5077 (2001)). 마우스 혈청내의 sMAP의 농도는 결정된 바 없다. 도 22a에 나타낸 바와 같
이, 그러나, 야생형 혈청내의 sMAP의 양은 MASP-2의 것보다 훨씬 많다. 따라서 sMAP는 MASP-2/sMAP 결합 부위
를 점유할 수 있으며, MASP-2가 MBL에 결합하는 것을 막고 결과적으로 MBL-MASP 복합체의 C4 분열 활성을 감
소시킨다. 렉틴 경로내의 sMAP의 조절 기작은 조사되지 않고 있다. sMAP가 보체 활성화의 전 후에 조절 역할
을 하는지 여부는 미지이다. sMAP는 미생물 감염전 MBL-MASP 복합체의 무의식적 활성화를 예방하거나 또는 활
성화된 경우 렉틴 경로의 과다활성화를 억제할 수 있게된다. 렉틴 경로내의 또 다른 잠재적인 조절자가 있다.
MASP-3는 또한 MBL에 결합시 MASP-2의 경쟁자이며 MASP-2의 C4 및 C2 분열 활성을 하향조절한다 (Dahl et al,
Immunity 15: 127-135 (2001)). sMAP와 MASP-3간의 상호작용이 조사되지 않았지만, 공동작용으로 렉틴 경로의
활성화를 하향조절할 수 있게된다.
이 연구에서, 우리는 sMAP와 MASP-2는 MBL에 결합하기 위하여 경쟁하며, sMAP는 MBL-MASP 복합체에 의하여 활
성화된 렉틴 경로를 하향조절할 수 있는 능력을 보유한다는 것을 입증하였다. sMAP이 피콜린-MASP 복합체에
의하여 활성화된 또 다른 경로의 렉틴 경로를 조절하는 것이 타당하다. MASP-2 및 sMAP는 또한 마우스 피콜린
A에 결합하기 위하여 경쟁하며, 피콜린 A-MASP 복합체의 C4 분열 활성을 하향조절한다 (Y Endo et al, 제조물
내). MBL 무효과 마우스의 연구가 최근 보고되었다 (Shi et al, J Exp Med 199: 1379-1390 (2004). MBL 무효
과 마우스는 MBL 렉틴 경로 내의 C4 분열 활성을 갖지 않으며, 스타필로코커스 아우레우스 감염에 걸리기 쉽
다. 현재의 연구에서, MASP-2의 결핍인 sMAP-/- 마우스는 렉틴 경로내의 C4 분열 활성과 함께 C3 분열 활성의
감소를 나타낸다. 이들의 손상된 옵소닌화 활성에 기인하여, sMAP-결핍 마우스는 박테리아 감염 걸리기 쉽다.
sMAP-결핍 마우스 추가의 조사에 의하여 감염성 질환에 대한 보호에 있어서 렉틴 경로의 기능을 분명히 하게
될 것이다.
공개특허 10-2012-0099680
또 다른 중요한 발견은 정상 혈청에 rsMAP를 첨가하여 C4의 활성화의 감소가 된다는 점이다 (도 26b). 렉틴
경로는 수종의 장기 내에서 염증 및 조직 손상을 조절한다고 입증되었다 (de Vries et al, Am J Pathol 165:
1677-1688 (2004); Fiane et al, Circulation 108: 849-856 (2003); Jordan et al, Circulation 104: 1413-
1418 (2001); Walsh et al, J Immunol 175: 541-546 (2005)). 흉복부 대동맥류의 치료를 한 MBL-결핍 환자에
있어서, 보체는 활성화되지 않았으며, 전염증 마커의 수준은 수술 후 감소되었다 (Fiane et al, Circulation
108: 849-856 (2003)). 축적된 증거들은 다양한 혈관 내의 허혈 및 재관류 증상에서 MBL의 잠재적인 병태생리
학적 역할을 입증하였다. 따라서, MBL의 특이적 차단 또는 렉틴 보체 경로의 억제는 허혈/관류-유관 손상을
예방하기 위한 치료적 관련 전략을 나타낸다. 따라서, 이들이 렉틴 경로 활성화의 감쇄제로 작용하기 때문에,
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