LAS INFECCIONES DE TRANSMISIÓN SEXUAL. - Euskadi.net

óptima de la muestra en la placa de agar, así
como el empleo de medios selectivos como
no selectivos. El diagnóstico presuntivo se
basa en la identificación de las colonias con
morfología característica en el agar, diplococos
gram negativos en la tinción de gram, oxidasa
positiva y posterior confirmación mediante
test bioquímicos u otros métodos. Bajo
estas condiciones óptimas de recogida y procesamiento
de la muestra el cultivo tiene una
gran sensibilidad y especificidad, es barato y
puede ser empleado en muestras de diversos
orígenes. Además se puede realizar un estudio
de susceptibilidad antibiótica con la cepa
aislada. No obstante el cultivo como técnica
para el diagnóstico presenta la desventaja de
ser laborioso.
Por último, existe la posibilidad de detección de
antígeno mediante EIA para el diagnóstico de
N. Gonorrhoeae. Estas pruebas son rápidas, fáciles
de realizar y no requiere la presencia de bacterias
viables. No obstante presenta múltiples
limitaciones, como: 1) no ser aptas para muestras
rectales y faringeas, 2) tener una reducida
sensibilidad en muestras endocervicales y en
pacientes con infección asintomática y 3) no
poder realizar antibiograma. A pesar de ello
esta técnica es valida para muestras uretrales
de varones y muestras de orina de la primera
micción en las cuales presenta unos niveles
adecuados de sensibilidad y especificidad.
1.3.2. Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos
Se ha desarrollado numerosas pruebas para la
detección y amplificación de ácidos nucleicos
mediante distintas técnicas como la PCR a
tiempo real, NASBA, LCR o la hibridación de
sondas con múltiples secuencias diana tanto
de RNA como de DNA. En general las técnicas
de hibridación son más especificas pero menos
sensibles que las otras técnicas y estás últimas
a su vez tienen mayor sensibilidad que
las técnicas de hibridación sobre todo para las
muestras rectales y faringeas. No obstante, las
técnicas que emplean como secuencia objetivo
la detección de genes del plásmido críptico
de N. gonorrhoeae (como por ejemplo cppB)
tiene menor sensibilidad ya que hasta en un
5% de los aislamientos de N. gonorrhoeae no
presentan este gen.
Además las técnicas de amplificación presentan
una desventaja que es la detección de falsos
positivos debido a especies comensales
de Neisseria spp. Este hecho enfatiza la necesidad
de una adecuada interpretación de las
técnicas moleculares así como la resolución
de posibles conflictos diagnósticos en muestras
dudosas mediante test de confirmación
empleando secuencias objetivo presente en
otros genes distintos de los empleados por las
técnicas comerciales. Este hecho unido a la capacidad
de N. gonorrhoeae para la recombinación
genética interespecies hace casi obligado
el uso de otros test moleculares de confirmación
con secuencias objetivos diferentes sobre
todo en muestras de origen extragenital.
1.4. CARACTERIZACIÓN DE LOS AISLAMIEN-
TOS DE N. GONORRHOEAE
1.4.1. Caracterización mediante técnicas fenotípicas
El auxotipado para la caracterización de las cepas
de N. gonorrhoeae es una técnica descrita
desde el año 1973. Los distintos auxotipos se
diferencian en las necesidades nutricionales
para aminoácidos, purinas, pirimidinas y vitaminas.
Esta técnica es muy laboriosa, bastante
cara, larga y además de ello tiene una capacidad
discriminatoria reducida.
Posteriormente se produjo el establecimiento
internacional de una técnica de determinación
de serogrupo y serovar usando una técnica de
coaglutinación basada en la diversidad antigénica
de la proteína externa de membrana porB.
La técnica es fácil de realizar, rápida, con un
adecuado coste-efectividad, no requiere equipamiento
sofisticado y proporciona información
acerca de la antigenicidad de la proteína
porB. Las desventajas de esta técnica son la reducida
capacidad discriminatoria, baja calidad
de los anticuerpos que generan problemas de
reproducibilidad, interpretación subjetiva
de los resultados en algunos casos.
221