Zeitschrift für Rheumatologie – Supplement 1 - Deutsche ...

Results: In the cjun promoter, a known insertion (at the position -617/
-618, 2 RA samples) and a new mutation were identifi ed (-823/-824,
1 OA sample). In addition, a new mutation was identifi ed in the junB
promoter (-484, 2 RA/2 OA samples). In the cfos promoter, 2 known
SNPs (-60, -135) were detected (both SNPs in 9 RA/8 OA/4 NC samples).
Th e simultaneous presence of all detected nucleotide exchanges in
SM tissue and blood indicates that they are germline mutations/SNPs.
All detected mutations/SNPs caused a signifi cant decrease of constitutive
reporter gene expression compared to the wt. Following stimulation
with PMA, mutations/SNPs in the promoters of cjun and cfos caused
a remarkable decrease of reporter gene expression (90% compared to
the wt), whereas the mutation –484 in the junB promoter only caused
a limited reduction in reporter gene expression.
Conclusion: Diff erent germline mutations/SNPs are located in protooncogene
promoters of RA and OA patients. All detected mutations/
SNPs result in a signifi cant functional inhibition of the promoter, hinting
to a possible role for the expression of disease-relevant genes in RA
and/or OA. Frequency analysis of the mutations/SNPs in larger patient
cohorts is ongoing.
FVFER2 8. Forum Experimentelle Rheumatologie
Teil 2: Autoimmunity in- and outside the joints-
paralells and differences
FVFER2-1
Ausbreitung von RA synovialen Fibroblasten im SCID Mausmodell
der RA: Nachweis der Migration
Kampmann A. 1 , Knedla A. 1 , Tarner IH. 1 , Stürz H. 2 , Steinmeyer J. 3 , Gay S. 4 ,
Müller-Ladner U. 1 , Neumann E. 1
1 Abt. Rheumatologie, JLU Gießen, Kerckhoff -Klinik, 2 Orthopädie, JLU
Gießen, 3 Exp. Orthopädie, JLU Gießen, 4 Zentrum für Exp. Rheumatologie,
USZ, Zürich, Schweiz
Zielsetzung: Die Rheumatoide Arthritis (RA) beginnt meist in wenigen
Gelenken und greift im Verlauf oft auf weitere Gelenke über.
Der Mechanismus des Krankheitstransfers ist bislang nicht defi niert
untersucht worden. Daher wurde ein Tiermodell entwickelt, bei dem
RA synoviale Fibroblasten (SF) mit normalem humanen Knorpel in
SCID-Mäuse koimplantiert werden, die Tiere aber zusätzlich an einer
entfernten, kontralateralen Stelle Knorpel ohne RASF implantiert bekommen.
Somit kann die RASF-Migration in diesen Tieren detailliert
beobachtet werden.
Methoden: Gruppe 1: 5x105 RASF wurden mit humanem Knorpel
in SCID-Mäuse koimplantiert. An der kontralateralen Flanke wurde
gesunder Knorpel implantiert. Gruppe 2: RASF wurden mit Knorpel
koimplantiert: nach 11 Tagen Einheilungszeit wurde in dasselbe Tier
Knorpel ohne RASF für 56 Tage kontralateral implantiert. Gruppe
3: Knorpel ohne RASF wurde an der kontralateralen Seite, nach 14 Tagen
Knorpel und RASF für 56 Tage implantiert. Nach Ablauf der Versuchszeit
wurden Implantate, Organgewebe und Blut entnommen.
Ergebnisse: RASF können den primären und auch den kontralateral
implantierten Knorpel invadieren. Der Invasionsgrad des kontralateralen
Implantates hängt hierbei vom Implantationszeitpunkt ab.
Werden beide Implantate gleichzeitig (Gruppe 1: primär Inv 2.5±0.5,
Deg 2.0±0.5; kontralateral Inv 1.8±0.5, Deg 1.3±0.5.), oder zunächst
das primäre Implantat mit RASF/Knorpel implantiert (Gruppe 2: primär
Inv 2.4±0.4, Deg 1.9±0.7; kontralateral Inv 1.8±0.5, Deg 2.1±0.9),
zeigten sich vergleichbare Invasions-/Degradationsgrade bei beiden
Implantaten. Wurde das kontralaterale Implantat ohne Zellen zuerst
implantiert (Gruppe 3: primär Inv 1.9±0.9, Deg 2.1±0.7; kontralateral
Inv 2.7±0.6, Deg 2.2±0.8), war die kontralaterale Invasion deutlich stärker.
In keinem der Organe (ausser Milz) wurden RASF nachgewiesen.
Diskussion: Off ensichtlich können RASF von einem Invasions-/
Degrada tionsort zu einem entfernten Knorpel wandern, da RASF eine
massive Invasion und Degradation eines kontralateralen Implantates
verursachen. Dieses Ergebnis unterstützt die Hypothese, dass RASF bei
der Ausbreitung der RA zwischen Gelenken beteiligt sind.
FVFER2-2
Pathogenic and protective role of T cells in glucose-6-phosphate-isomerase-induced
arthritis
Bruns L. 1 , Frey O. 1 , Schubert D. 2 , Reichel A. 1 , Morawietz L. 3 , Krenn V. 3 ,
Kamradt T. 1
1 Institut für Immunologie, Friedrich-Schiller-Universität Jena, 2 Deutsches
Rheumaforschungszentrum Berlin, 3 Institut für Pathologie, Charite Universitätsmedizin
Berlin
Autoimmunity against the systemic autoantigen glucose-6-phosphate
isomerase (G6PI) can induce arthritis in mice. In the TCR transgenic
K/BxN model G6PI-specifi c T cells drive the production of autoantibodies.
Once generated, the autoantibodies alone are suffi cient to transfer
disease into naïve recipients. In contrast to these fi ndings, T cells play
a major role both in the induction and the eff ector phase of G6PI-induced
arthritis in genetically susceptible nontransgenic strains of mice.
We show that the T cell response against G6PI is biased towards a highly
infl ammatory phenotype with a predominant production of IL-6,
TNF-α and IL-17. Neutralization of either IL-6 or TNF-α can inhibit
disease progression. Depletion of CD4+ T cells before clinical signs of
arthritis blocks the disease and more importantly, depletion on the clinical
peak of arthritis can cure the disease, demonstrating a critical role
for T cells not only in disease induction but also during eff ector stage.
Th e highly infl ammatory T cell subset is controlled by CD4+CD25+
regulatory T (Treg) cells: depletion of Treg prior to immunization increases
the number of IL-17 producing cells and can switch the selflimited
disease into a more chronic disease. Moreover, mice recovered
from arthritis are protected against a reinduction of the disease. We are
currently examining the role of Treg in this protection. Taken together,
this data demonstrates for the fi rst time that CD4+ T cells can have a
critical role as a direct eff ector cell in the pathogenesis of arthritis and
might therefore have some implications for the development of new
T cell directed therapies of human rheumatoid arthritis.
FVFER2-3
Anti-Infl ammatory Eff ects of Atorvastatin in Rheumatoid Arthritis
Blaschke S. 1 , Viereck V. 2 , Schwarz G. 3 , Klinger HM. 3 , Guerluek S. 1 , Bernhard
A. 1 , Wolf G. 1 , Müller GA. 1
1 Abt. Nephrologie und Rheumatologie, Universitätsklinik Göttingen,
2 3 Abt. Gynäkologie, Klinik Frauenfeld, Abt. Orthopädie, Universitätsklinik
Göttingen
Introduction: Statins such as atorvastatin (ATV) are 3-Hydroxy-3-methylglutaryl
coenzyme A (HMG-CoA) reductase inhibitors widely used
as lipid-lowering agents in medical practice. Several in vitro and in vivo
studies suggest that statins may also exert immunomodulatory eff ects
by inhibition of proinfl ammatory cytokine production in monocytes/
macrophages as well as by direct inhibition of interferon-γ -(IFN-γ)
induced MHC-II expression. Rheumatoid arthritis (RA) represents a
chronic infl ammatory disease of still unknown etiology characterized
by predominant T helper cell type 1 (Th 1) cytokine expression profi le.
In this study, we analyzed the in vitro eff ects of ATV on Th 1 (IFN-γ)
and Th 2 (IL-4, IL-10) cytokine production in diff erent peripheral T cell
subsets as well as on chemokine production of synovial fi broblasts isolated
from RA patients to characterize potential immunomodulatory
eff ects of ATV in RA.
Materials and Methods: Peripheral blood mononuclear cells (PBMC)
were isolated from 25 RA patients and 20 healthy blood volunteers
(both groups not treated with statins) as controls and were stimulated
in vitro with 0.1 μM ATV. PBMC were analyzed before and aft er 24h of
ATV stimulation by fl ow cytometry for CD4, CD8, CD 69 and HLA-
Zeitschrift für Rheumatologie · Supplement 1 · 2006 | S19