Untersuchungen zur Analytik und zum Einfluss technologischer ...

20 Theoretischer Teil
al., 1996; Snippe et al., 1994]. Verschiedene Autoren beschreiben auch eine
Säurefällung der Proteine z.B. mit Natriumwolframat / Schwefelsäure [Boison et al.,
1991; Hong und Kondo, 2000; Ito et al., 2000; Tarbin et al., 1995] oder
Trichloressigsäure [Ang und Luo, 1997; Leroy et al., 1992; Verdon und Couedor, 1996].
Zur Entfettung der Proben werden die Lipide mit unpolaren Lösemitteln wie Hexan
[Becker et al., 2001; Riediker und Stadler, 2001], Isooctan [Verdon und Couedor, 1999]
oder Ethylacetat [Marchetti et al., 2001] extrahiert. Ebenso werden Extraktionen über
Flüssig / Flüssig-Verteilungen durchgeführt. Geeignete Lösemittel sind hierfür
Acetonitril oder Dichlormethan [Ang et al., 1996; Blanchflower et al., 1994; Pérez et al.,
1997]. In den letzten Jahren häufiger im Einsatz ist die Festphasenextraktion (SPE –
solid phase extraction) vor allem mit C18 modifiziertem Kieselgel aber auch anderen
Materialien [Dasenbrock und LaCourse, 1998; Taguchi et al., 1999; Takeba et al.,
1998; Verdon und Couedor, 1999] wie Restricted-Access Materials (RAM), bei denen
das Trennprinzip auf einer Fraktionierung der Probe in Analyt- und Matrixfraktion durch
sterische Ausschlusschromatographie der Makromoleküle und Adsorptionschromatographie
der Analyten beruht [Ibach, 1999; Schäfer und Lubda, 2001].
Dünnschichtchromatographische Methoden (DC)
In der Penicillinanalytik werden DC-Methoden zur qualitativen, semiquantitativen und
auch quantitativen Bestimmung eingesetzt. Laut Literatur sind verschiedene
Fließmittel, stationäre Phasen und Detektionsmöglichkeiten, z.B. mit Ninhydrin oder
Derivatisierung zu Fluoreszenzprodukten, im Einsatz [Abjean und Lahogue, 1997;
Boison, 1992; Bossuyt et al., 1976; Kreuzig, 1996; McGilveray und Strickland, 1967;
Manni et al., 1973; Moats, 1983].
Gaschromatographie (GC)
Gaschromatographische Methoden zur Bestimmung von Penicillinen sind in der
Literatur wenige beschrieben [Hamann et al., 1975; Meetschen und Petz, 1991, Mineo
et al., 1992]. Die amtliche Sammlung von Untersuchungsmethoden nach §35
Lebensmittel- und Bedarfsgegenständegesetz (LMBG) gibt eine prävalidierte Methode
zur Bestimmung von sieben Penicillinen in Geweben und Milch an [Amtl. Sammmlung
§35, L 01.01/02]. Hierbei handelt es sich um die durch zwei weitere Laboratorien
validierte Methode von Meetschen und Petz.