Untersuchungen zur Analytik und zum Einfluss technologischer ...

Diskussion 81
Detektion von Matrixbestandteilen gegeben und damit die Analytquantifizierung
gestört.
Zur Möglichkeit der Quantifizierung weiterer Penicilline mit amperometrischen
Detektion wurden unter Verwendung der Goldelektrode die Penicilline Ampicillin,
Amoxicillin, Methicillin, Penicillin V, Penicillin G, Flucloxacillin und Nafcillin mittels des
HPLC-System nach Ibach [Ibach, 1999] einzeln detektiert. Ampicillin und Amoxicillin
ließen sich wie erwartet mit dem HPLC / ECD-System nicht detektieren. Dies lag in der
fehlenden Anreicherung an der C18 - LiChrospher ADS-Kartusche begründet. Die
amphoteren Penicilline haben aufgrund ihrer NH2-Gruppe eine geringere
Wechselwirkung mit dem Säulenmaterial und gingen somit bei der on-line
Anreicherung verloren. Bei Methicillin und Penicillin G wurde nur ein kleines Signal
erhalten, was in der ebenfalls nicht ausreichenden Anreicherung begründet lag, da
diese für die Isoxazolylpenicilline optimiert war. Penicillin V lies sich, obwohl es eine
durch den Sauerstoff der Phenoxygruppe bedingt höhere Polarität besitzt, besser als
Penicillin G auf der C18 - LiChrospher ADS-Kartusche anreichern. Dieses Verhalten
bestätigten auch Versuche zur Elutionsreihenfolge der Penicilline an einer C18-Phase
[Lihl et al., 1996]. Penicillin V, Nafcillin und Flucloxacillin konnten mit der Methode
erfasst werden. Das Potentialoptimum für Flucloxacillin lag in der Größenordnung der
anderen Isoxazolylpenicilline. Nafcillin und Penicillin V zeigten bei ca. 600 mV ein
geeignetes Messpotential. Die Quantifizierung von Standardlösungen war für die
Penicilline Penicillin V, Oxacillin, Cloxacillin, Flucloxacillin, Nafcillin und Dicloxacillin
möglich.
Bei den Versuchen in Milchmatrix ergaben sich Probleme durch auftretende Störpeaks
zur Retentionszeit von Penicillin V und Oxacillin, die aus der Oxidation bzw. Reduktion
der Matrixbestandteile bei dem gegebenen Potential resultierten. Eine Validierung und
weitere Optimierung der Methode zur Analyse anderer Penicilline wurde nicht
durchgeführt. In der amtlichen Praxis werden mittlerweile überwiegend LC-MS-
Untersuchungen durchgeführt, über die ein breites Spektrum von Antibiotikarückständen
quantifiziert und identifiziert werden kann. Die „wall jet“-Messzelle
verbesserte die Empfindlichkeit der Messung nicht in einen Maße, wie es für die
Penicillinanalytik wünschenswert gewesen wäre.
Die Ergebnisse konnten zeigen, dass eine Penicillinanalytik mittels amperometrischer
Detektion bei einem konstanten Potential über die Kombination von photochemischer
Derivatisierung und Messung über eine Goldelektrode möglich ist.