Untersuchungen zur Analytik und zum Einfluss technologischer ...

Diskussion 83
wurde eine Methode zur Bestimmung sowohl von Nafcillin als auch Flucloxacillin neben
Oxacillin, Cloxacillin und Dicloxacillin entwickelt. Da beide Substanzen Nafcillin und
Flucloxacillin ähnliche Eigenschaften wie die Isoxazolylpenicilline Oxacillin, Cloxacillin
und Dicloxacillin aufwiesen, konnte davon ausgegangen werden, dass sie sich bei
Aufarbeitung, Trennung, Derivatisierung und Detektion leicht in die Methode einfügen
lassen.
Die mittels DAD aufgenommenen UV-Absorptionsspektren der photochemisch
derivatisierten Produkte bestätigen diese Erwartungen (Punkt 2.3.1). Das
Absorptionsmaximum für das Flucloxacillin liegt bei 300 nm. Für das Nafcillin ergibt
sich ein Maximum bei der etwas geringeren Wellenlänge von 280 nm, aber auch bei
300 nm ist eine Detektion, wenngleich mit etwas geringerer Empfindlichkeit, möglich.
Nafcillin und Flucloxacillin zeigten im Chromatogramm ähnliche Retentionszeiten. Eine
Trennung der beiden Analyten (Punkt 2.2) konnte nach dem Wechsel einer
unbrauchbar gewordenen, mit vielen Matrixproben genutzten, alten Säule durch eine
Säule gleichen Typs nicht wiederholt werden. Auch durch eine Modifizierung der
HPLC-Analyse konnte keine bessere Trennung erreicht werden, ohne die Trennung
und Detektion der anderen Isoxazolylpenicilline zu verschlechtern.
Die bestimmten Verfahrenskenndaten wurden im Bereich von 15 µg/kg (1/2 x MRL),
30 µg/kg (1 x MRL) und 60 µg/kg (2 x MRL) ermittelt, da in diesem Arbeitsbereich auch
die zu erwartenden Rückstandskonzentrationen liegen. Tabelle 18 zeigt eine
Zusammenfassung der Ergebnisse.
Penicillin Wiederfindung
[%]*
Variationskoeffizient
[%]*
Nachweisgrenze
[µg/kg]*
Verfahrensvariationskoeffizient
[%]*
Nafcillin 67 9 10 9
Flucloxacillin 67 5 8 6
*Gemittelte Werte aus jeweils 36 Bestimmungen.
Tabelle 18: Zusammenfassung der ermittelten Verfahrenskenndaten
Die ermittelten Verfahrenskenndaten entsprechen, wie unter Punkt 2.3.2 ausgeführt,
den von der EU geforderten Standards [Entscheidung der Kommission 93/256/EWG,
1993].