Untersuchungen zur Analytik und zum Einfluss technologischer ...

46 Experimenteller Teil
2.3.1 UV-Absorptionsspektren
Ausgehend von der Einbeziehung von Nafcillin und Flucloxacillin in die analytische
Trennung mit elektrochemischer Detektion war das Ziel, die beiden Antibiotika in das
UV-Detektions-System zu integrieren, da in der Routineanalytik in Ämtern und
Handelslaboratorien die Anwendung von UV-Detektoren weit verbreitet ist und eine
Anschaffung der „wall jet“-Messzelle zusätzliche Kosten verursachen würde. Ebenso
wurde auf den HPLC-Eluenten aus Acetonitril / Phosphatpuffer (Punkt 5.2.1.2)
zurückgegriffen. Da die optimale Trennung von Nafcillin und Flucloxacillin unter 2.2 an
einer bereits über 2-3 Jahre verwendeten mit vielen Matrixproben genutzten Säule
erzielt wurden, konnte nach Unbrauchbarkeit der Säule, eine vergleichbare Trennung
auch an einer neuen Säule desselben Typs, nicht wieder erreicht werden, weder mit
der Eluentenzusammensetzung für die ECD-Bedingungen noch für die HPLC-
Eluenten, zu denen wieder zurückgekehrt wurde.
Zur Feststellung der geeigneten Wellenlänge für die Messung der photochemisch
entstandenen Derivatisierungsprodukte wurden UV-Absorptionsspektren für Nafcillin,
Flucloxacillin, Oxacillin, Cloxacillin und Dicloxacillin aufgenommen. Für die Messung
der fünf Penicilline wurden mit einem Photodioden-Array-Detektor (DAD) bei den
Wellenlängen 270-340 nm UV-Spektren aufgezeichnet. Diese eingeschränkte Wahl der
Wellenlängen ergab sich aus der Arbeit von Lihl [Lihl, 1995], in der Oxacillin, Cloxacillin
und Dicloxacillin nach photochemischer Reaktion detektiert wurden. Die Spektren von
Oxacillin, Cloxacillin und Dicloxacillin wurden zum Vergleich aufgenommen. Es wurde
das bestehende HPLC-System (Punkt 5.2) mit einer mit Hg254-Lampe zur
photochemischen Derivatisierung und einem 5 m Coil im Photoreaktor verwendet, was
einer Bestrahlungszeit von 60 s entspricht. Die Ergebnisse zeigt Abbildung 23.