Untersuchungen zur Analytik und zum Einfluss technologischer ...

Diskussion 91
Penicillosäure, Penicillensäure, Penillsäure, Penillosäure, Penicillamin, und Polymere
des Penicillins als Abbauprodukte erwartet.
Als Methode zur Bestimmung dieser Produkte war die LC-MS/MS mit Elektrospray-
Ionisation und Triple-Quadrupol-Technik als Massenanalysator geeignet, da bei der
Elektrospray-Technik die Massen auch unzersetzt in den Massenanalysator gelangen
können. Dies war für einen Scan auf die erwarteten Masse / Ladungs-Zahlen sowie
dem Scan auf weitere unbekannte Substanzen wichtig, da für Fragmente keine
Vergleichsspektren vorlagen. Des weiteren hat sich diese Technik für die Analytik der
Penicilline durchgesetzt (Punkt 1.2.9.2), so dass Methoden zur Bestimmung von
intakten Penicillinen vorlagen [Becker et al., 2001].
Als Tierarzneimittelrückstände wurden die Penicilline Penicillin G und Cloxacillin, als in
die Mastitisbehandlung häufig eingesetzte und damit in der Milch zu identifizierende
Substanzen, untersucht. Die beiden Penicilline unterscheiden sich in ihrer Eigenschaft
der Säurestabilität, Cloxacillin gilt als säurestabil [Schröder et al., 1982]. Die Penicilline
sind damit in Bezug auf den zu erwartenden elektrophilen Angriff und damit dem
Abbau, besonders interessant.
Es wurden Versuche in Ameisensäurelösung sowie Milchsäurelösung durchgeführt.
Ameisensäure wurde gewählt, da bei einem niedrigen pH-Wert (pH 2) ein deutlicherer
Abbau und damit die bessere Identifizierung der Produkte erwartet wurde.
Ameisensäure ist auch Bestandteil des LC-MS-Eluenten und erbringt somit keine
Probleme bei der Ionisation der Substanzen. Milchsäure wurde als bei der
Joghurtproduktion entstehende Säure zum Vergleich des technologischen Prozesses
(pH 4) gewählt. Als Produkte wurden in diesen Lösungen, neben den
Ausgangsverbindungen Penicillin G und Cloxacillin, Penicillosäure, Penillosäure und
vor allem Penillsäure gefunden. Der hohe Anteil an Penillsäure nach saurem Abbau
bestätigt die Angaben aus der Literatur [van Krimpen, et al., 1987], die einen Abbau
von Penicillin G zu 37 % zu Penillsäure angeben. Weitere 10 % Penillsäure entstehen
nach van Krimpen über die zu 50 % entstandene Penicillensäure, welche sich zu 20 %
zu Penillsäure umwandelt. Eine graphische Darstellung zeigt Abbildung 5 (unter Punkt
1.2.2.3). Deutliche Unterschiede zeigen sich in der Intensität des Abbaus, abhängig
vom pH-Wert. Bei pH 2 (Ameisensäurelösung) zeigt sich ein weitergehender Abbau
über die Penillosäure hinaus, zu Substanzen mit kleineren Massen, von denen im LC-
MS-Versuch keine mehr zu identifizieren waren. Bei pH 4 (Milchsäurelösung) sind die