Identifikation und immunologische Charakterisierung von MHC ...

1. Einleitung
zellbiologischen Abläufe bei der MHC-II-abhängigen Antigenprozessierung
und –präsentation berücksichtigt werden.
Eine relativ erfolgreiche und systematische Strategie bestand in einem 1999
von Wang vorgestellten genetischen Verfahren. Hierbei wurden aus
Tumorzellen generierte cDNAs an die invariante MHC-II-Kette-Gen (Ii)
fusioniert (Wang et al., 1999a; Wang et al., 1999b). Die sekretorischen als auch
die zytoplasmatischen Proteine werden so in den exogenen Pfad der
Antigenprozessierung geleitet und potenziell zu MHC-II-restringierten
Helferepitopen verarbeitet. Der Ii-TA-Fusionsvektor wird anschließend in
antigenpräsentierende HEK293IMDR-Zellen, die zusätzlich wichtige
Komponenten des MHC-II-Pfades (HLA-DM, -DRa, DRb) überexprimieren,
transfiziert. Die Detektion antigenspezifischer Immunreaktionen erfolgt
schließlich durch Kokultivierung dieser Zellen mit patienteneigenen,
tumorspezifischen CD4+ T-Zellen (Wang et al., 1999b).
Eine biochemische Strategie zur Auffindung von T-Helferzellantigenen basiert
auf der Peptidelution von MHC-II-positiven Tumorzellen (Li et al., 1998b).
Auch Proteinfraktionierungen aus Tumorzelllysaten mit anschließender
Proteinidentifikation mittels Massenspektrometrie führte zur Identifikation
neuer Tumorantigene (Pieper et al., 1999). Die immunologische
Antigendetektion erfolgt bei diesen Strategien über tumorspezifische CD4+
T-Zellen. Patienteneigene CD4+ T-Lymphozyten mit ausreichender
Tumorspezifität sind allerdings nur bei wenigen Tumorentitäten – z.B. bei
MHC-II-exprimierenden Melanomen aus tumorinfiltrierenden Lymphozyten
(TIL) – kultivierbar. So können für die Identifikation von tumorassoziierten
Helferzellantigenen sowohl das genetische als auch das biochemische
Verfahren bei der Mehrzahl der Tumorarten a priori nicht genutzt werden.
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