Identifikation und immunologische Charakterisierung von MHC ...

4. Ergebnisse
Mikrokulturen (jeweils 2 x 10 5 Zellen). Mikrokulturen mit Peptid, die im Vergleich zu Kulturen
ohne Peptid größer als dreifache Proliferationsraten aufwiesen, wurden als peptidspezifisch
gewertet. Die Abschätzung peptidspezifischer T-Zellfrequenzen (f) erfolgte gemäß folgender
Formel: f = ([Anzahl peptidspezifischer Mikrokulturen]) / (48 x 2 x 10 5).
4.3.2 Generierung von peptid-spezifischen CD4+ T-Lypmphozyten
Humane T-Lymphozyten aus PBMC von gesunden Kontrollprobanden wurden in
vitro mit den synthetischen Peptiden stimuliert. Als antigen-
/peptidpräsentierende Zellen fungierten zum einen Monozyten und
B-Lymphozyten, die in der PBMC-Fraktion enthalten sind, und zum anderen reife
dendritische Zellen (mDC). Eine vorherige Selektion von CD3+ T- bzw. CD4+
T-Lymphozyten wurde nicht durchgeführt. Nach einwöchiger Kultur wurden die
Zellen hinsichtlich ihrer peptidspezifischen Proliferation mittels
[ 3 H]-Thymidineinbau analysiert (Abb. 4.8).
Stimulation Index
9
6
3
0
0 1 2 3 4
DR
3,4
DR
1,11
DR
11,13
DR
11,11
S10
Stimulation Index
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DR
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S88
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