Identifikation und immunologische Charakterisierung von MHC ...

4. Ergebnisse
Abb. 4.5 Wesentliche Schritte für die Herstellung eines Adenovirus (Ad5/F35).
Abb. 4.5A: Nachweis der Ligation und Klonierung des chimären Gens in pcDNA3.1: Nach der
Klonierung wurden die Plasmidpräparationen analysiert. Die Restriktion erfolgte mit den
Enzymen NheI und KpnI. Spalten 1 bis 4 zeigen mögliche erfolgreiche Klonierungen. Die Spalten 5
bis 7 zeigen erfolglose Klonierungen (M: Marker, bp: Basenpaare).
Abb. 4.5B: Nachweis der Ligation und Klonierung des chimären Gens in pShuttle: Nach der
Klonierung wurden die Plasmidpräparationen analysiert. Bei erfolgreichen Konstrukten sollte
nach Restriktion mit I-CeuI und PI-SceI ein Fragment von 948 bp erkennbar sein. Spalte 2 zeigt eine
mögliche erfolgreiche Klonierung. Die Spalten 1 und 3 zeigen erfolglose Klonierungen
(bp:-Basenpaare).
1 2 3 4 5 6 7 M
1
2
1 2 3
1 2 3
- PR3-LAMP-1
- 500 bp
- 948 bp
- virales Konstrukt
Abb. 4.5C: Restriktionsanalyse der viralen Vektor-DNA (Ad5/F35): Die Vektor-DNA wurde mit
PacI geschnitten. In allen drei Spuren kann das gewünschte Fragment detektiert werden.
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