Identifikation und immunologische Charakterisierung von MHC ...
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4. Ergebnisse<br />
medium<br />
S10<br />
S88<br />
P216<br />
+ anti-HLA-DR (HB-55)<br />
+ anti-HLA-ABC (HB-95)<br />
+ anti-HLA DR,DQ (HB-180)<br />
0 200<br />
0<br />
400<br />
0<br />
600<br />
0<br />
800<br />
0<br />
100 120<br />
00 00<br />
cpm<br />
Klon Gö11-3/4-S10.3<br />
Abb. 4.9: Spezifität <strong>und</strong> <strong>MHC</strong>-Restriktionsmuster der T-Zellantworten gegen die Peptide S10,<br />
S40, S88, P58, P216, P235 <strong>und</strong> P239. Einzelne T-Zellklone wurden aus peptidspezifischen T-Zellinien<br />
mittels »limiting dilution« kultiviert. Exemplarisch ist die proliferative Antwort <strong>von</strong> S10-peptid-<br />
spezifischen T-Zellklon gegenüber korrespondierendem Peptid (S10) sowie unspezifischen<br />
Kontrollpeptiden gezeigt (S88, P216). Durch Koinkubation der T-Zellklone mit autologen DC, dem<br />
spezifischen Peptid <strong>und</strong> funktionell blockierenden Antikörpern gegen humanes HLA-ABC, -DR<br />
<strong>und</strong> -DQ wurde das HLA-Restriktionsmuster der Peptidepitope untersucht. Der Nachweis einer<br />
Proliferation erfolgte mittels [ 3H]-Thymidin-Einbau 72 h nach Stimulation mit den entsprechenden<br />
Peptiden <strong>und</strong>/oder Antikörpern (cpm: counts per minute).<br />
Durchflusszytometrische Analysen mit fluoreszenzmarkierten spezifischen<br />
Antikörpern zeigten eine für CD4+ T-Lymphozyten typische Koexpression <strong>von</strong><br />
CD3 <strong>und</strong> CD4 (Abb. 4.10) bei allen peptidspezifischen T-Zellklonen.<br />
140<br />
00<br />
160<br />
00<br />
180<br />
00<br />
200<br />
00<br />
71
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