Supplement 1 10. Jahrgang September 2010 D57442 ... - DGPRÄC

Vorträge | Samstag | 18.9.2010
Eigenfett
Samstag, 12:00–14:00 Uhr, Großer Saal
V170 L Einfluss unterschiedlicher Lokalanästhetika auf
die Vitalität und Differenzierungsfähigkeit von Präadipozyten
unter dem Einfluss von Q10
Keck M, Zeyda M, Stulnig T, Kamolz L-P, Frey M
Medizinische Universität Wien
Die Weichteilrekonstruktion mittels Eigenfett ist eine etablierte Methode
in der Plastischen und Rekonstruktiven Chirurgie. In der gängigen
Literatur werden unterschiedliche Resorptionsraten des transplantierten
Fettes angegeben. Die Identifizierung der Faktoren, welche das
Überleben der Zellen beeinflussen, ist Gegenstand der gegenwärtigen
Forschung. Im Rahmen der dargestellten Studie untersuchten wir den
Einfluss einiger Lokalanästhetika sowie Coenzym Q10 auf die Vitalität
und Differenzierungsfähigkeit von Präadipozyten.
Methode: Aus exzidiertem humanen Fettgewebe wurden Präadipozyten
isoliert und in einem Q10-haltigen Medium kultiviert. Nach 48 h wurden
die Zellkulturen mit Lidocain, Ropivacain, Mepivacain, Bucain,
Artecain und NaCl-Lösung für 30 min inkubiert. Es erfolgte die Vitalitätsmessung
mittels FACS-Analyse. 12 Tage nach Induktion der Präadipozyten
zur Differenzierung wurde mittels Realtime PCR die Genexpression
von Adiponectin bestimmt.
Ergebnisse: Die Vitalität der Präadipozyten nach Inkubation mit den Lokalanästhetika
lag signifikant unter der NaCl-Kontrolle. Es zeigten sich
ebenfalls signifikante Unterschiede bezüglich der Differenzierungsfähigkeit
zwischen den Lokalanästhetika. Es zeigte sich kein Einfluss von
Q10 auf Vitalität und Differenzierungsfähigkeit.
Diskussion: Es zeigt sich ein signifikanter Einfluss der untersuchten Lokalanästhetika
auf die Vitalität und Differenzierungsfähigkeit der Präadipozyten.
Dies könnte die unterschiedlichen Einheilungsraten im Rahmen
der Eigenfett-Transplantation erklären.
V171 L In-vivo-tracing von Mikrofett-transplantaten
Deglmann CJ, Blazków-Schmalzbauer K, Moorkamp S, Carlsen J, Rogach A,
Wagner E, Baumeister RGH, Ogris M
Universitätsklinikum München-Großhadern
Bei der autologen Fettgewebstransplantation ist eine Nachverfolgung
von avaskulären Microfett-Tansplantaten in vivo nur schwer durchführbar.
Experimentell konnte bislang nur durch eine histologische Aufarbeitung
ex post ein Hinweis auf den Verblieb der Transplantate gefunden
werden.
Hypothese: Ziel unserer Arbeit ist die Etablierung einer Methodik, die
mittels nanotechnisch speziell hergestellter Nanokristalle, Quantum
Dots (QDots, 7 nm Durchmesser) transplantierte Fettcluster (adulte
Adipocyten) im Tiermodell in vivo nachweisen und verfolgen kann.
Methode: Fettgewebe wurde von weiblichen Balb/c-Mäusen subkutan,
gonadal und inguinal entnommen und mechanisch zerkleinert. Negativ
geladene CdTe-Quantum Dots wurden in NaCl 0,9 % gelöst [9 nmol]
und mit den Fettclustern für 1 h inkubiert. Nach einem Waschvorgang
wurde je 1 ml der mit QDots inkubierten Fettcluster subcutan im Rückenbereich
von narkotisierten balb/c-Mäusen transplantiert. Die Injektionstelle
wurde mit Dermabond®-Gewebekleber verschlossen. Eine
Kontrollgruppe bestand aus Transplantaten von thermisch avitalisierten
Fettclustern (+QDot). Das Fettgewebe (+QDot) wurde sowohl in vitro
als auch in vivo mittels eines Nahe-Infrarot-Lichtes zur Fluoreszenz
angeregt und die Messung der Signalstärke [total flux in p/s] mit dem
Plastische Chirurgie 10 (Suppl. 1): 67 (2010)
Abstracts
IVIS® Lumina Imaging System durch eine Darstellung der Signalstärke
in einem Farbencode ermittelt. Die Fettclustertransplantate und die
Kontrollgruppe wurden 38 Tage lang beobachtet. Die Signalstärke [p/s]
wurde in den ersten 7 Tagen täglich ermittelt und danach in regelmäßigen
Abständen (Tag 11, 17, 24, 31 und 38) gemessen. Nach der Invivo-Beobachtungszeit
wurden die Transplantate exstirpiert und sowohl
makro- als auch mikroskopisch untersucht.
Ergebnisse: Die transplantierten avitalisierten Fettcluster zeigten im Beobachtungszeitraum
ein Signal von 1,01e+10±0,44 [total flux in p/s]
[MW±SA] am Tag 1 und wiesen eine kontinuierliche Signalreduktion
bis auf 0,18e+10±0,07 [MW±SA] am 38. Tag auf, was einer relativen
Fluoreszenzstärke von 17,8 % im Vergleich zum Anfangssignals
(nach 15 Min.) entspricht. Bei den vitalen Fettclustertransplantaten
(+QDot) wurden am 1. Tag 5,68e+10±1,96 [MW±SA] und am 38.
Tag 0,23e+10±0,04 [MW±SA] erreicht. Nach initialem Abfall des Signals
bis zum 4. Tag auf 32,7 % der Anfangsstärke zeigte sich ein stabiles
Fading mit einer relativen Fluoreszenzstärke von 4 % am 38. Tag. Die absolute
Signalstärke bei den avitalisierten Transplantaten lag bei 17,77%
im direkten Vergleich zu den vitalen Fettzellclustern 15 min nach Implantation.
Mikroskopisch zeigten die Fettcluster multiple kleine Ölzysten,
die zwischen den vitalen Fettzellkonglomeraten lokalisiert waren. Die
avitalisierten Fettcluster organisierten sich zu einer einzelnen großen Ölzyste,
die klar vom Bild der vitalen Fettcluster abgrenzbar waren.
Fazit: Die vorgestellte neuartige Methode des In-vivo-Tracings von Fettzelltransplantaten
mit Quantum Dots erlaubt es erstmals die kritische
Zeitphase von 4 Wochen nach einer avaskulären Fettzell-Transplantation
in vivo zu verfolgen. Die Untersuchung der Korrelation zwischen der
Fluoreszenzstärke und der Vitalität der Fettcluster soll in einer weiteren
Langzeitstudie durchgeführt werden.
V172 L Quantum Dots als tracer für
Fettcluster-transplantation
Blazków-Schmalzbauer K, Moorkamp S, Rogach A, Wagner E, Baumeister RGH, Ogris M, Deglmann CJ
Universitätsklinikum München-Großhadern
Bei der avaskulären autologen Fettzelltransplantation ist der Verbleib
der transplantierten Fettcluster schwer zu detektieren. Als vorbereitender
Schritt für eine in vivo Detektion sollen potentielle Zellmarker in
vitro an Fettzellcluster getestet werden.
Hypothese: Quantum Dots (QDots) sind nanotechnisch hergestellte Nanokristalle,
welche von Zellen aufgenommen werden oder adhärieren.
Mittels einer nahe-infrarot Fluoreszenzanregung können die Signalstärken
der QDots [in total flux p/s] detektiert werden und in vivo beobachtet
werden. Die negativ geladenen QDots sollten auf Anheftung an die
Fettzellcluster getestet und mit avitalisierten Fettzellclustern verglichen
werden. Die Eignung als potentieller in vivo Tracer für Fetttransplantate
soll untersucht werden.
Methode: Fettcluster wurden von Balb/c Mäusen inguinal und abdominal
entnommen und mechanisch zerkleinert. Eine Gruppe von Fettclustern
wurde direkt, eine zweite Gruppe nach termischer (90 °C) Avitalisierung
mit CdTe-QDots (7 nm) bei 37 °C für 1 h inkubiert. Initial und
nach zweifachem Waschvorgang wurde die Signalstärke mit dem IVIS®
Lumina Imaging System mittels einer Nahe-Infrarot-Anregung ermittelt.
Die Signalstärke [total flux in p/s] wurde in einen Farbencode umgewandelt
und ausgewertet. Zur Testung der In-vivo-Stabilität der negativ geladenen
QDots wurden jeweils 0,5 ml QDot-Lösung (9 nmol) subcutan im
Rückenbereich von Balb/c Mäusen injiziert und mit Cardiogreen Injektionen
(1 mg/1 ml NaCl 0,9 %) verglichen. In vivo wurden die subcutanen
Injektionen über 38 Tage mit dem Imaging System verfolgt.
Ergebnisse: Die Signalstärke [p/s] bei den vitalen Fettclustern ergab initial
7,84e+09±3,75 [p/s] [MW±SA] und bei den avitalisierten Fettclustern
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