Supplement 1 10. Jahrgang September 2010 D57442 ... - DGPRÄC

Poster | Donnerstag | 16.9.2010
P11 L synergistische Effekte von sonoporation und
taurolidine/tRAIL bei der Apoptoseinduktion in humanen
Fibrosarkomzellen
Daigeler A, Chromik AM, Haendschke K, Emmelmann S, Siepmann M, Hensel K, Schmitz G,
Klein-Hitpass L, Steinau H-U, Lehnhardt M, Hauser J
BG-Klinik Ludwigshafen, BG-Universitätsklinikum Bergmannsheil Bochum
Die derzeit wirksamste Therapie der Weichgewebssarkome besteht in
der Resektion mit Sicherheitsabstand und der adjuvanten Radiatio. Bei
Tumoren der Extremitäten müssen dafür häufig funktionelle Strukturen
geopfert werden. Standardchemotherapeutika sind meist nur gering
wirksam und können die Tumoren nicht nennenswert verkleinern.
Taurolidin und TRAIL sind neuere Substanzen für die bereits eine
Wirksamkeit gegen Fibrosarkome nachgewiesen werden konnte. Verschiedene
Studien berichten von positiven Effekten der sonodynamischen
Therapie, das heißt der gleichzeitigen Verabreichung von Chemotherapeutikum
und Ultraschall.
Hypothese: Da die meisten Sarkome Weichgewebssarkome für Ultraschall
gut zugänglich sind, könnte dadurch eine Wirkverbesserung erreicht
werden.
Methoden: HT1080 Fibrosarkomzellen wurden in vitro mit Chemotherapeutika
und zusätzlich einem Ultraschallkontrastmittel (SonoVue®)
bestehend aus sogenannten „Microbubbles“ inkubiert. Diese verstärken
den Effekt der Sonoporation (transiente Erhöhung der Membranpermeabilität)
durch Ultraschall. Außerdem wurden die Zellen über eine
spezielle Vorrichtung Ultraschall (peak negative pressure: 0,98 MPa)
ausgesetzt. Apoptose und Nekrose wurde mittels FACS-Analyse und
TUNEL-Assay gemessen. Die Effekte auf die Genexpression wurden im
RNA-microarray (Affymetrix) überprüft.
Ergebnisse: Die proapoptotischen Effekte von Taurolidin und TRAIL
wurden weder durch Ultraschall alleine oder die solitäre Zugabe des
Kontrastmittels verändert. Eine Beschallung nach vorheriger Zugabe
von SonoVue steigerte die Apoptose allerdings signifikant. Eine Vielzahl
von apoptoseassoziierten Genen fand sich hierbei verändert. Teilweise
wurden diese schon mit programmiertem Zelltod in Fibrosarkomen
(HSPA1A/HSPA1B, APAF1, PAWR, SOCS2) oder Ultraschall induzierter
Apoptose in anderen Zellen in Verbindung gebracht (CD44). Erstmals
konnte in dieser Studie ein synergistischer Effekt von Ultraschall,
Ultraschallkontrastmittel und Chemotherapeutikum belegt und Einblicke
in die molekularen Ursachen gewährt werden.
Fazit: Weitere Studien werden klären, ob dieses Verfahren wirksam zu
Therapie von Weichgewebssarkomen eingesetzt werden kann.
P12 L Wirkung von taurolidin und tRAIL auf humane
Fibrosarkomzellen im Nacktmaus-Modell
Daigeler A, Emmelmann S, Lehnhardt M, Hirsch T, Tilkorn D-J, Goertz O, Steinau H-U, Steinsträßer L
BG-Unfallklinik Ludwigshafen, BG-Universitätsklinikum Bergmannsheil Bochum
Weichgewebssarkome stellen eine seltene Gruppe von Malignomen dar.
Bisher stehen kaum wirksame Chemotherapeutika zur Verfügung. Die
Substanzen TRAIL und Taurolidin zeigten in vitro eine gute Apoptose
induzierende Wirkung auf humane Fibrosarkomzellen. Mit dem athymischen
Nacktmausmodell soll nun die Wirksamkeit in vivo überprüft
werden.
Hypothese: Taurolidin und TRAIL wirken in vivo antitumoral auf Fibrosarkomzellen.
Methoden: 40 Tiere wurden in 4 Gruppen à 10 Mäuse über 12 Tage untersucht.
Die Tumoren wurden durch die subkutane Injektion einer
Zellsuspension aus der Fibrosarkom-Zelllinie HT1080 (1x106 gelöst
Plastische Chirurgie 10 (Suppl. 1): 77 (2010)
Abstracts
in 100ml PBS) subkutan an beiden Flanken (n=80) appliziert. Die
Behandlung erfolgte mit 2, 10 und 20 µl TRAIL+1,5 ml Taurolidin 2
% sowie 1,5 ml PBS (Kontrolle) intraperitoneal über 4 Tage. Für die
weiteren 4 Therapietage wurde die Dosis von Taurolidin bzw. PBS auf
750 µl reduziert. Täglich wurde das Tumorwachstum mit einem Calliper
vermessen und das Gewicht bestimmt. Futter und Wasser standen
den Tieren während der gesamten Zeit in einem ausreichenden Maß zur
Verfügung. Nach Studienende wurden Tumoren, Herz, Leber, Milz und
Nieren entnommen und histologisch untersucht.
Ergebnisse: Alle Tumoren, die mit der Kombination aus Taurolidin und
TRAIL behandelt wurden zeigten ein signifikant geringeres Tumorwachstum
in Vergleich zur Kontrolle (2 µl TRAIL + Taurolidin 2 %
vs.Kontrolle p=0,001; 10 µl TRAIL + Taurolidin 2 % vs. Kontrolle
p=0,008 und 20 µl TRAIL+ Taurolidin 2 % p=0,01). Im Therapiearm
verstarben in der 2-µl-Gruppe im Median 6, in der 10-µl-Gruppe
8 und in der 20-µl-Gruppe 7 Mäuse. In der Kontrollgruppe überlebten
alle Tiere den Beobachtungszeitraum. Dementsprechend waren sowohl
die Gewichtsverläufe, als auch der Futter- und Wasserverbrauch bei den
behandelten Tieren signifikant niedriger im Gegensatz zur Kontrolle
(Gewichte aller therapierten Tiere vs. Kontrolle p