Supplement 1 10. Jahrgang September 2010 D57442 ... - DGPRÄC

Abstracts
um ca. 15 % im ischämisch geschädigten Lappenareal in den behandelten
Tieren gegenüber den Kontrolltieren festgestellt. Das hier skizzierte
Verfahren der „Therapeutischen Angiogeneseinduktion“ stellt eine Art
der Präkonditionierung im später ischämisch gefährdeten Gewebe dar.
P19 L Nitinol-Netze und Fettstammzellen –
ein Hybridimplantat
Strauß S, Dudziak S, Barcikowski S, Herzog D, Reimers K, Vogt PM
Medizinische Hochschule Hannover
Aufgrund ihrer mechanischen Eigenschaften stellt die Legierung Nitinol
(NiTi) eine interessante Option als Osteoimplantat dar. Jedoch ergeben
sich auch hier die Nachteile eines jeden metallischen Vollimplantats wie
schlechte Integration und daraus resultierende Implantat-Lockerung
und Entzündungsreaktionen. Die Lösung der Problematik könnte ein
netzartiges Implantat sein, welches vor Implantation mit patienteneigenen
Fettstammzellen (ASC) besiedelt wurde. ASCs können unter gegebenen
Bedingungen osteogen differenzieren und so die Neubildung von
Knochen an der Defektstelle unterstützen. Die Netzstruktur bietet die
Möglichkeit zur Vaskularisation und damit eine optimale Versorgung des
neuentstehenden Gewebes.
Hypothese: Eine Kombination aus netzartig strukturiertem NiTi und Fettstammzellen
bietet optimale Eigenschaften zur Besiedlung mit ASC und
deren osteogener Differenzierung um in Zukunft anstelle von metallischen
Vollimplantaten zur Osteoimplantation bei Defekten verwendet
zu werden.
Material und Methoden: NiTi-Netze mit unterschiedlicher Stegbreite und
Mesh-Dichte werden mittels selektivem Lasersintern generiert und mit
ASC besiedelt. Die ASC wurden zuvor aus humanem Fettgewebe isoliert
und bis zu vier Mal passagiert. Die Kultivierung erfolgt 24 h bis 48 h für
Kurzzeitanalysen und bis zu 6 Wochen für die osteogene Differenzierung.
Die osteogene Differenzierung wird chemisch über das Medium
induziert. Das Zellverhalten auf den Trägern wird mittels Rasterelektronenmikroskopie,
Histologie und Immunfluoreszenz untersucht.
Ergebnisse: Rasterelektronen- bzw. Lichtmikroskopie zeigen normales
Zellverhalten bzw. -aussehen. Kontrollen auf Titan-Trägern zeigen ein
vergleichbares Bild (nicht abgebildet) Im Verlauf der osteogenen Differenzierung
bilden die ASC eine dicke Extrazellularmatrix (ECM) aus,
auch dies lässt sich auf den Kontrollen beobachten. Chemisch induziert
differenzieren ASC auf NiTi-Netzen osteogen. Es lassen sich für die
osteogene Differenzierung charakteristischen Faktoren wie z.B. BMP-
6 nachweisen. Auch in der calciumspezifischen Alizarin red Färbung
konnte die gewünschte Mineralisation der ECM nachgewiesen werden.
Fazit: ASC adhärieren, proliferieren und differenzieren osteogen auf Ni-
Ti-Trägern mit Netzstruktur. Zur Implantation sind 24–48 h besiedelte
Träger am besten geeignet, da in dieser Phase nur die Netzstege von
Zellen umhüllt sind. Bei längerer Kultivierung überwuchern die Zellen
das Netz komplett und bilden eine dicke ECM. Dies könnte die Vaskularisation
erschweren. Das allergene Potential von NiTi-Implantaten wird
derzeit kontrovers diskutiert und soll auch im Rahmen dieser Arbeit in
Zukunft Beachtung finden. Darüber hinaus ist die Erprobung des netzartigen
Hybridimplantats im Tiermodell geplant, um die Integration und
Vaskularisation weitergehend zu analysieren.
P20 L sensibilisierung resistenter tumoren für
klassische therapien durch Herunterregulierung
apoptosehemmender Gene
Bucan V, Reimers K, Lazaridis A, Vogt PM
Medizinische Hochschule Hannover
Poster | Donnerstag | 16.9.2010
Die Proteinkinase Akt/PKB (Proteinkinase B) nimmt in ihrer aktivierten
Form als Bestandteil des durch Stimulation zahlreicher Wachstumsfaktorrezeptoren
stimulierten PI3K/Akt-Signaltransduktionsweges eine
zentrale Rolle als antiapoptotischer Signalvermittler ein. In Tumoren ist
der PI3K/Akt-Weg häufig dereguliert und eine aberrante Aktivierung
von Akt resultiert in einem in der Regel fortgeschrittenen und aggressiven
Phänotyp sowie Resistenz gegenüber zytotoxischer Behandlung und
Neoangiogenese.
Hypothese: Das bislang wenig charakterisierte antiapoptotische membranassoziierte
Protein Lifeguard (LFG) ist an der Aufrechterhaltung von
Konditionen beteiligt, die die Apoptoseinduktion entscheidend vermindern.
In eigenen Vorarbeiten konnten wir die Regulation der LFG-Expression
durch den LEF-1/Akt-Signalweg nachweisen. Es sollte nun die
Hypothese überprüft werden, dass durch Herunterregulation von LFG
die Sensitivität gegenüber Perifosine, das mit der Akt-Aktivierung assoziiert
ist, gesteigert wird.
Methoden: In den Versuchen wurden in tumorigenen Kulturen E1/E3
deletierte adenovirale Serotyp-5-Vektoren eingesetzt. Die erfolgreiche
LFG-Gensuppression durch die RNAi-Ansätze wurde mittels RT-PCR
analysiert. In den Versuchsreihen wurden MCF-7-Mammakarzinomkulturen
und SW872 Sarkomkulturen mit steigenden Perifosinekonzentrationen
von 2–20 µM über einen Zeitraum von 2 bis 48 Stunden behandelt.
Es folgten Bestimmungen der Zellvitalität mittels Apoptoseassay in
allen Versuchsreihen.
Ergebnisse: 48 Stunden nach der Zugabe von LFG-RNAi-Ansätzen zeigte
sich eine deutliche Gensuppression in MCF-7- und SW872-Zelllinien.
Die LFG-Expression betrug zu dem Zeitpunkt nur noch 18 % in Vergleich
zu Kontrollen. Zusätzliche Behandlung der Zellen Perifosine hatte
steigende Apoptoseraten in beiden Zelllinien zur Folge verglichen mit
der Kontrollreihen. Dabei zeigte sich eine deutliche Dosis und Zeit-abhängige
Korrelation.
Fazit: Die Ergebnisse geben Aufschluss über die Apoptosesensibilisierung
unter der Geninaktivierung von LFG bei verschiedenen Karzinom-Zelltypen
und sollen in Zukunft auf weitere resistente Tumoren im Hinblick
auf klinisch zugelassene Chemotherapeutika ausgeweitet werden.
P21 L Glands as a potential source of tissue resident
endothelial progenitor cells
Zhang Z, Hopfner U, Danner S, Kremer M, Kruse C, Machens H-G, Egana JT
Klinikum rechts der Isar der TU München
Several studies have shown the existence of circulating and bone marrow
derived endothelial progenitor cells (EPCs). These cells are responsible
of adult vasculogenesis and play an important role in wound healing and
tissue regeneration. Although it is clear that EPC reside in bone marrow,
new evidences support the idea of alternative EPCs niches. Here we
show evidence in vitro and in vivo of the possible role of exocrine glands
as a new source of EPC.
Methods: Gland stem cells were isolated from pancreas and salivary
glands from a Tie2-LacZ genetically modified mouse. Then, cells were
cultivated in endothelial differentiation medium. Afterwards, endothelial
features were analyzed in vitro and in vivo.
80 Plastische Chirurgie 10 (Suppl. 1): 80 (2010)