Vypracované otázky z mikrobiologie

CabiCz & Lenjulenka 2010/2011
NEPŘÍMÁ AGLUTINACE
- určuje se typ Ag izol. od pacienta pomocí známého séra (Ab)
→ sérotypizace bakterií: důl. u Salmonella; detekce enteropatog., enterotoxig., enteroinvaz. a
enterohemorag. sérovarů E.coli: zejm. sérovar O157:H7 původce nebezp. onem – průjmy až HUS
PŘÍMÁ HEMAGLUTINACE
- Ag = ery – vážou heterofilní Ab (= s bb. jiného typu reagující Ab) → pozitivita = aglutinace ery
- Paul-Bunnelova reakce = průkaz inf. mononukleosy (EB virus)
INHIBICE HEMAGLUTINACE (HIT)
← neutralizační metoda
- hemaglutinace způs. virem je Ab naváz. na tento virus inhibována
- dg. chřipky, zarděnky aj. virózy, jejichž původci nesou hemaglutinin
AGLUTINACE NA NOSIČÍCH
- Ag nebo Ab jsou uměle naváz. na pasivní nosič: ery nebo latexové partikule
→ ery: nepřímá hemaglutinace: Ag naváz. na ery, kt. se po přidání séra s Ab shlukují; Ag může být LPS,
toxiny, povrch Vi Ag salmonell, viry, tuberkulin; nejčastější je reakce TPHA = Treponema pallidum
haemagglutination – dg. syfilis
→ latex. částice: latexová aglutinace: Ag na částicích – např. gamaglobulin → aglutinace je průkazem
revmatoidního faktoru při latexfixačním testu – dg. revmatoidní artritidy
- komerně dodáv. latex. částice s růz. naváz. Ag: streptokoky, pneumokoky, meningokoky, hemofily,
rotaviry aj. v likvor, séru, moči, sputu apod.
- latexový test se užívá také k typizaci izolovaných streptokoků
PRECIPITACE
→ reakce Ab s rozpustným/koloid. Ag → nerozp. komplex
- ve vodné roztoku nebo v agarovém/agarosovém gelu
- prstencová reakce – ve zkum. se převrství roztok Ab roztokem Ag → prstenec na rozhraní obou vrstev;
smísení roztoků: komplex se vylučuje ve formě vloček = flokulační reakce – např. screening. testy na
syfilis: VDRL (Veneral Disease Reasearch Laboratory) a RRR (Rapid Reagin Reaction)
- precipitace v gelu – jamky vykrojené v agaru Ab a Ag – difundují gelem → tvoří v zóně ekvivalence
precipitační linie
- průkaz difterického toxinu: raznicí se v agaru v Petriho misce vyříznou 4 jamky uspoř. do □ – uprostřed
mezi jednu dvojici: čára zkoušeného kmene Corynebacterium diphtheriae, mezi druhou: čára referenčního
toxigenního kmene
- do jamek se nakape antidifter. sérum (obs. antitoxin), do levých v c 5 m.j., do pravých 25 m.j. → po
inkubaci se sleduje vznik precip. linií v prostoru mezi čárou bakt. kultury a přísl. jamkou
- dvojité uspořádání podle Ouchterlonyho: kolem cent. jamky se sérem vykrojeno něk. jamek s růz. Ag →
po difúzi se mezi centr. a perif. jamkami vytvoří prec. linie → lze vyčíst údaje o specifitě Ag a Ab:
o jestliže precipitační linie plynule splývají = koaleskují → totožnost Ag
68