Vypracované otázky z mikrobiologie

CabiCz & Lenjulenka 2010/2011
o v místě styku linií je část. koalescence a jedna z linií pokračuje nezávisle ve formě tzv. ostruhy →
příbuznost Ag
o linie nepříb. Ag se nezávisle protínají
VAZBA KOMPLEMENTU (komplementfixace, KFR)
- volný komplement lyzuje ery; pokud se naváže na komplex Ab-Ag → vázaný komplement nelyzuje ery
- vzorek = lidské sérum (vlastní komplement nejdříve inaktivován zahřátím na 56°C)
- Bordet-Wassermanova reakce při dg. syfilis: použití kardiolipinu jako Ag, s nímž. Ab proti Treponema
pallidum nespec. reagují za vzniku komplexu → komplement nelyzuje ery = pozitivní výsledek
- neg. výsledek = hemolýza
- např. pro průkaz Ab v dg. brucellosy, listeriosy, Q horečky, inf. Mycoplasma pneumoniae a vir. inf.
NEUTRALIZACE
← inh. někt. z biol. vlastností Ag protilátkami přít. ve vzorku
- např. virusneutralizační testy: přít. Ab se projeví inhibicí infekčnosti virů a jejich neúčinností v indik.
systému (pokusné zvíře, bun. kultura)
- nebo výše uvedený test komplementfixace: inhibice HA schopností virů protilátkami v séru
- test na průkaz antistreptolysinu O (ASO) = Ab proti streptolysinu produk. streptokoky (hl. S.pyogenes) –
přidání vyš. séra ke známým konc. komerčně dodáv. streptolysinu O; nezneutraliz. streptolysin =
hemolýza indik ery; jeho konc. se udává v m.j. – c do 200 m.j. = normální; vyšší c ukazuje na nedávnou inf.
hemolyt. streptokoky, příp. její pozdní následky (revmat. horečku, glomerulonefritidu)
METODY ZNAČENÝCH PROTILÁTEK
- Ab nebo Ag jsou znač. naváz. indikátorem: fluorescenční barvivo, radioisotop, enzym
- tyto konjugáty se vážou na přísl. Ag nebo Ab ve vzorku → ozřejmují vznik komplexu Ag-Ab
- imunofluorescence
- ELISA – indikátorem je navázaný enzym → přísl. barevná enzymat. reakce
- RIA (RadioImunoAssay) – reakční složky značeny radioisotopy
- Western blotting – dělení složek komplexního Ag – elfo v polyakrylamidovém gelu (po část. denaturaci) –
rozdělení složky se přepijí do nitrocelulosové membrány ← nanese se zkoumané séru: jsou-li přít. Ab,
navážou se na frakce Ag a přít. vzniklého komplexu se dokáže následnou reakcí se znač. antihumánním Ig
za vzniku barevných proužků na mem. v místě komplexu ← průkaz Ab proti HIV, lymeské borelióze a HCV
SÉROTYPIZACE
= stanovení Ag struktury = sérovaru – virulence nemusí být vázána na urč. druh bakterie – ale urč. typy a
variety, kt. se v této vlastnosti liší: patogenní a nepatogenní kmeny: např. kmeny EHEC, EIEC aj. E.coli a její
komenzální kmeny; dále se uvnitř patogenních druhů mohou nalézat variety lišící se charakterem a
projevy vyvol. onem. ← Salmonella enterica: různé sérovary různá onem. (břišníí tyfun, průjmy i metast.
hnis. onem.); liší se také závažnost onem.: Vibrio cholerae sérovar O1 → cholera, kt. je často ; non-O1
vibria (neaglutinovatelná – NAG) způs. méně závažné projevy onemocnění
- patogenita jednotl. variet je často váz. na další vlastnosti, někdy je spoj. i s odliš. biochem. vlastnostmi
(např. E.coli prod. verotoxin jsou větš. sorbitol-neg.); obv. je však spojena s antigenní strukturou daného
kmene
69