ANÁLISIS ESTRUCTURAL DE LA PROTEÍNA EXTRÍNSECA PsbQ ...

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Resultados
También están expuestos al disolvente, según la predicción de PROF, los lazos que unen las
distintas hélices.
3.2. Análisis estructural por CD.
En la Figura 31 se muestra el espectro de CD de la proteína PsbQ recombinante en 20 mM Tris-
HCl pH 8.0. El espectro se caracteriza por tener una banda intensa y positiva a 193 ± 1 nm, y dos
bandas intensas y negativas a 209 ± 1 y 219 ± 1 nm. Estas bandas son características de
estructuras secundarias de α-hélice (Holzwart & Doty, 1965) lo que sugiere que ésta es la
estructura predominante en PsbQ.
[θ] (deg . cm 2 . dmol -1 )
5x10 4
4x10 4
3x10 4
2x10 4
1x10 4
0
-1x10 4
-2x10 4
-3x10 4
190 200 210 220 230 240 250 260
λ (nm)
Figura 31. Espectro de dicroísmo circular de PsbQ en 20 mM Tris-HCl pH 8.0 a 25 ºC. La
línea punteada muestra el ajuste a los datos experimentales por el método LINCOMB. El
espectro se caracteriza por un máximo a 193 nm y dos mínimos a 209 y 219 nm, con valores
de elipticidad molar de 42500, -22500 y -19500 deg cm 2 /dmol, respectivamente.
La cuantificación del contenido total de α-hélice en PsbQ se realizó por el método de
Greenfield y Fasman (Greenfield & Fasman, 1969), resultando en una contribución de
aproximadamente un 63 %. El espectro se estudió además por cinco métodos diferentes, según
se comentó en el capítulo de materiales y métodos. En la Tabla VII se muestran los
porcentajes de α-hélice, hoja-β, y giros o estructura no regular según cada uno de estos