ANÁLISIS ESTRUCTURAL DE LA PROTEÍNA EXTRÍNSECA PsbQ ...

Resultados
de un punto isodicroico a 204 nm que indicaría que el proceso de desnaturalización puede ocurrir
en dos estados. En la Figura 56B se representa la elipticidad a 220 nm en función de la
temperatura donde se observa una única transición entre 55 y 75 ºC, con una temperatura
media de transición de aproximadamente 63 ºC. La superposición del espectro de CD de PsbQ en
20 mM Tris-HCl a 90 ºC y PsbQ en 6.0 M GdnHCl a 90 ºC indica que ambos estados
desnaturalizados son estructuralmente equivalentes (Figura 57).
A B
CD (mdeg)
50
40
30
20
10
0
-10
-20
-30
-40
200 210 220 230 240 250 260
λ (nm)
20C
32C
55C
60C
65C
70C
75C
90C
92C
CD (mdeg)
-4
-6
-8
-10
-12
-14
-16
-18
-20
-22
-24
20 30 40 50 60 70 80 90
T (ºC)
Figura 56. Desnaturalización de PsbQ por temperatura según la técnica de CD UV-lejano. (A) Espectros
de PsbQ a diferentes temperaturas. (B) Curva de desnaturalización (cuadrados negros) a 220 nm en
función de la temperatura. Se incluye el ajuste por mínimos cuadrados a la ecuación [20] (línea continua).
CD (mdeg)
80
60
40
20
0
-20
-40
q6MCG20C
q6MCG90C
q6MCG90a20C
qTRIS20C
qTRIS90C
qTRIS90a20C
200 210 220 230 240 250 260
λ (nm)
Figura 57.Comparación de los espectros de CD obtenidos por desnaturalización química (q6MCG20C y
q6MCG90C, 6 M GdnHCl a 20 ºC y 90 ºC, respectivamente) y térmica (qTRIS20C, a 20ºC y qTRIS90C, a
90 ºC). Al comparar los estados desnaturalizados a la misma temperatura (q6MCG90C y qTRIS90C)
podemos concluir que son estructuralmente equivalentes.
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