ANÁLISIS ESTRUCTURAL DE LA PROTEÍNA EXTRÍNSECA PsbQ ...

6.4. Calorimetría diferencial de barrido (DSC). 67
6.5. Análisis de datos. 69
6.5.1. Desnaturalización por agentes químicos. 69
6.5.2. Desnaturalización por agentes térmicos. 70
6.5.3. Medidas calorimétricas. 71
RESULTADOS 73
1. Análisis evolutivo de las proteínas extrínsecas del OEC 75
2. Preparación y caracterización de la muestra de PsbQ 80
2.1. Aislamiento de la proteína PsbQ nativa de espinaca y purificación. 80
2.2. Expresión de la proteína PsbQ de espinaca recombinante y purificación. 82
2.2.1. Construcción del vector de expresión. 82
2.2.2. Expresión y purificación de PsbQ recombinante. 82
2.3. Estudios por ultracentrifugación analítica. 83
3. Estudio de la estructura secundaria de PsbQ por técnicas bioinformáticas
y por técnicas biofísicas 86
3.1. Análisis de la estructura 1D de PsbQ por técnicas bioinformáticas. 86
3.1.1. Búsqueda en las bases de datos de proteínas homólogas
de secuencia. 86
3.1.2. Predicción de estructura secundaria de PsbQ por redes
neuronales. 90
3.2. Análisis estructural por CD. 93
3.3. Análisis estructural por FTIR. 94
4. Estudio de la estructura terciaria de PsbQ por técnicas bioinformáticas
y por técnicas biofísicas 97
4.1. Predicción del plegamiento por métodos bioinformáticos. 97
4.1.1. Reconocimiento del plegamiento por threading. 97
4.1.2. Selección del molde adecuado para la estructura de PsbQ. 102
4.1.3. Construcción y evaluación del modelo de PsbQ. 103
4.2. Análisis por absorción. 105
Índice
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