ANÁLISIS ESTRUCTURAL DE LA PROTEÍNA EXTRÍNSECA PsbQ ...

Resultados
La dependencia de ∆Hcal con Tm permitió estimar el valor del cambio de la capacidad
calorífica entre el estado nativo y el desnaturalizado (Figura 64A) resultando en ∆CP = 1.2 ± 0.1
kcal/mol/K. Además, relacionando la variación de Tm con respecto al pH (Figura 64B) se pudo
calcular la diferencia entre el número de protones del estado desnaturalizado con respecto al
estado nativo debido al proceso de desnaturalización, ∆ν, según la ecuación [25]. Este
parámetro se incluye en la Tabla XXI donde se comprueba que a pH 2.0 hay un cambio
apreciable entre el estado de protonación de la fracción desnaturalizada y de la fracción nativa.
∆H (Kcal/mol)
A
75
70
65
60
55
50
50 55 60 65
T (ºC) m
Figura 64. (A). Variación de la entalpía de desnaturalización en función del cambio en la Tm al variar el pH.
Se representa ∆HvH (▲) para los experimentos de CD, y ∆Hcal (■) y ∆HvH (°) para los experimentos de DSC,
según los valores presentados en las Tablas XX y XXI. (B) Representación del cambio en Tm en función del
pH para la proteína PsbQ según CD (▪) y DSC (●).
Tabla XXI. Parámetros termodinámicos obtenidos por DSC para PsbQ a diferentes pH.
pH T m (ºC)
∆H cal
(Kcal/mol)
T (ºC) m
40
1 2 3 4 5 6 7 8
∆H vH
(Kcal/mol)
∆H cal/∆H vH
2 52.5 ± 0.1 54.2 ± 0.5 55.8 ± 0.7 0.97 0.73
4 62.6 ± 0.04 70.0 ± 0.5 73.2 ± 0.7 0.96 0.46
6 64.5 ± 0.03 64.6 ± 0.4 70.1 ± 0.6 0.92 0.06
8 64.8 ± 0.8 61.3 ± 0.8 71.6 ± 1.1 0.85 -0.3
A partir de los parámetros termodinámicos, Tm, ∆Hcal y ∆CP, se obtuvo la curva de
estabilidad de PsbQ a pH 8.0 según la ecuación de Gibbs-Helmholtz [23], que se representa en
B
65
60
55
50
45
pH
∆ν
135