(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

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앞서 언급된 바와 같이, IL-6은 신호-전달 당단백질 gp130의 적어도 하나의 아단위 및 IL-6 수용체(IL-6R)로 구
성되는 수용체 복합체를 통하여 세포 반응을 촉진하는 사이토킨 집단의 구성원이다. IL-6R은 또한, 가용성 형태
(sIL-6R)로 존재할 수 있다. IL-6은 IL-6R에 결합하고, 이는 이후, 신호-전달 수용체 gp130을 이합체화시킨다.
본 발명의 항-IL-6 항체, 또는 이들의 IL-6 결합 단편 또는 변이체는 항-IL-6 활성을 나타냄으로써 유용한 것으
로 생각된다. 본 발명의 무제한적 구체예에서, 본 발명의 항-IL-6 항체, 또는 이들의 IL-6 결합 단편 또는 변이
체는 가용성 IL-6 또는 세포 표면 발현된 IL-6인 IL-6에 결합함으로써 항-IL-6 활성을 나타내고 및/또는 IL-
6R에 IL-6의 결합 및/또는 gp130 신호-전달 당단백질의 활성화(이합체화)와 IL-6/IL-6R/gp130 멀티머의 형성,
그리고 전술한 것 중 한 가지의 생물학적 효과를 예방하거나 저해할 수 있다. 본 발명의 항-IL-6 항체는 특정
항체가 IL-6에 결합하는 위치(즉, 에피토프) 및/또는 상기 항체가 전술한 IL-6 복합체 및/또는 멀티머의 형성,
그리고 이들의 생물학적 효과에 영향을 주는 방법에 기초하여 상이한 길항 활성을 가질 수 있다. 결과적으로,
본 발명에 따른 상이한 항-IL-6 항체는 예로써, 실질적인 가용성 IL-6의 형성과 축적을 수반하는 이상, 예를 들
면, 류머티스성 관절염을 예방 또는 치료하는데 더욱 적합하고, 반면 다른 항체는 IL-6/IL-6R/gp130 또는 IL-
6/IL-6R/gp130 멀티머의 예방이 바람직한 치료 결과인 치료에 유리할 수 있다. 이는 결합 분석 및 다른 분석에
서 결정될 수 있다.
본 발명의 항-IL-6 항체, 그리고 IL-6에 결합 특이성을 갖는 이들의 단편과 변이체의 항-IL-6 활성은 또한, IL-
6에 대한 결합 강도 또는 친화성으로 기술될 수 있다. 이는 또한, 그들의 치료 특성에 영향을 줄 수 있다. 본
발명의 한 구체예에서, 본 발명의 항-IL-6 항체, 그리고 IL-6에 결합 특이성을 갖는 이들의 단편은 5x10 -7
, 10 -
7
, 5x10 -8
, 10 -8
, 5x10 -9
, 10 -9
, 5x10 -10
, 10 -10
, 5x10 -11
, 10 -11
, 5x10 -12
, 10 -12
, 5x10 -13
, 10 -13
, 5x10 -14
, 10 -14
, 5x10 -
15
또는 10 -15
이하의 해리 상수(dissociation constant, KD)로 IL-6에 결합한다. 바람직하게는, 항-IL-6 항체 및
이들의 단편과 변이체는 5x10 -10
이하의 해리 상수로 IL-6에 결합한다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, 본 발명의 항-IL-6 항체, 그리고 IL-6에 결합 특이성을 갖는 이들의 단편과 변
이체의 항-IL-6 활성은 10 -4
S -1
, 5x10 -5
S -1
, 10 -5
S -1
, 5x10 -6
S -1
, 10 -6
S -1
, 5x10 -7
S -1
, 또는 10 -7
S -1
이하의 오프
-레이트(off-rate)로 IL-6에 결합한다. 본 발명의 한 구체예에서, 본 발명의 항-IL-6 항체, 그리고 IL-6에 결합
특이성을 갖는 이들의 단편과 변이체는 선형 또는 구조성 IL-6 에피토프에 결합한다.
본 발명의 추가의 구체예에서, 본 발명의 항-IL-6 항체, 그리고 IL-6에 결합 특이성을 갖는 이들의 단편과 변이
체의 항-IL-6 활성은 IL-6과 연관된 질환과 이상의 증상을 개선하거나 감소시키고, 또는 대안으로, 이들 질환과
이상을 치료하거나 예방함으로써 항-IL-6 활성을 나타낸다. IL-6과 연관된 질환과 이상의 무제한적 실례는 하기
에 열거된다. 언급된 바와 같이, 암-관련된 피로, 악액질과 류머티스성 관절염은 본 발명의 항-IL-6 항체에 적
합한 징후이다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, 본 명세서에서 기술된 항-IL-6 항체, 또는 이들의 IL-6 결합 단편 또는 변이체
는 IL-6R 또는 gp-130 신호-전달 당단백질에 대한 결합 특이성을 갖지 않는다.
B-세포 스크리닝과 분리
한 구체예에서, 본 발명에서는 적어도 하나의 항원-특이적 세포를 분리하는데 이용될 수 있는 항원-특이적 B 세
포의 클론 집단을 분리하는 방법을 제시한다. 하기에 기술되고 예시된 바와 같이, 이들 방법은 별개로, 공동으
로, 순차적으로, 반복적으로, 또는 주기적으로 이용될 수 있는 일련의 배양과 선별 단계를 포함한다. 바람직하
게는, 이들 방법은 원하는 항원에 특이적인 단일클론 항체, 또는 이러한 항체에 상응하는 핵산 서열을 생산하는
데 이용될 수 있는 적어도 하나의 항원-특이적 세포를 분리하는데 이용된다.
한 구체예에서, 본 발명에서는 아래의 단계를 포함하는 방법을 제시한다:
a. 적어도 하나의 항원-특이적 B 세포를 포함하는 세포 집단을 준비하는 단계;
b. 예로써, 색층분석으로 세포 집단을 농축하여 적어도 하나의 항원-특이적 B 세포를 포함하는 농축된 세포 집
단을 형성하는 단계;
c. 농축된 B 세포 집단으로부터 단일 B 세포를 분리하는 단계; 그리고
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공개특허 10-2011-0112308