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Abschlussbericht AiF-FV 13733N<br />
Fazit:<br />
CMP weist eine hohe Löslichkeit über einen breiten pH-Bereich (pH 1-9) auf. Zwischen pH 2<br />
und 4 kommt es zu einer Abnahme der Löslichkeit der nicht glykosylierten Fraktionen, was<br />
auf eine isoelektrische Fällung zurückzuführen ist, wohingegen das glykosylierte CMP auch<br />
bei pH 2-4 löslich bleibt.<br />
4.2 Hitzestabilität von CMP<br />
Die Hitzestabilität von CMP wurde in einem Temperaturbereich von 80 °C bis zu 120 °C und<br />
einer Heißhaltezeit bis zu 20 min untersucht. Nach der Hitzebehandlung wurden die Proben<br />
filtriert und der Gehalt an CMP mittels RP-HPLC ermittelt. In Bild 4-3 ist der Gehalt an CMP<br />
relativ zur Ausgangsprobe in Abhängigkeit der Heißhaltezeit bei 120°C dargestellt. Es ist zu<br />
erkennen, dass bis zu einer Heißhaltezeit von 10 min keine Verluste an CMP auftreten, d.h.<br />
keine Denaturierung infolge der Hitzeeinwirkung erfolgt. Erst bei Heißhaltezeiten über 10 min<br />
nimmt der CMP-Gehalt der Proben leicht ab. Bei einer Heißhaltezeit von 20 min wurde lediglich<br />
ein Verlust von 10 % des gesamten CMP ermittelt. Davon war nahezu ausschließlich<br />
der Gehalt der nichtglykosylierten Fraktionen betroffen, während der Gehalt an glykosylierten<br />
Fraktionen konstant blieb. Auch die RP-HPLC-Fingerprints wiesen keine Veränderungen auf,<br />
d.h. das Glykosylierungsmuster war unverändert. Bei niedrigeren Temperaturen konnte innerhalb<br />
einer Heißhaltezeit von 20 min kein Verlust an CMP ermittelt werden.<br />
Bild 4-3: Gehalt der einzelnen CMP-Fraktionen relativ zur Ausgangsprobe nach einer Hitzebehandlung<br />
bei 120 °C in Abhängigkeit der Heißhaltezeit<br />
Fazit:<br />
c t /c 0 [-]<br />
1,2<br />
1,2<br />
1,2<br />
1,1<br />
1,1<br />
1,0<br />
1,0<br />
1,0<br />
0,9<br />
0,9<br />
0,8<br />
0,8<br />
0,8<br />
0,7<br />
0,7<br />
0,6<br />
0,6 0,6<br />
0,5<br />
0,5<br />
0,4<br />
0,4<br />
0,4<br />
0,3<br />
0,3<br />
0,2<br />
0,2<br />
0,2<br />
0,1<br />
0,1<br />
c 0 (CMP gesamt) = 2 g/l<br />
c 0 (Glyco-CMP) = 0,87 g/l<br />
c 0 (CMP A) = 0,81 g/l<br />
c 0 (CMP B) B) = 0,32 g/l<br />
CMP gesamt<br />
Glyco-CMP<br />
CMP A<br />
CMP B<br />
0,0<br />
0,0<br />
0,0 0 0 2 2 4 4 6 6 8 8 10 10 12 12 14 14 16 16 18 18 20<br />
20<br />
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20<br />
Heißhaltezeit [min]<br />
120 °C<br />
CMP weist eine hohe Hitzestabilität auf, was auf das Fehlen einer Sekundärstruktur des Moleküls<br />
zurückzuführen ist.<br />
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