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Abschlussbericht AiF-FV 13733N
Herstellung der Gele
Zunächst wurde für alle Proben eine Proteinstammlösung hergestellt. Hierzu wurde das jeweilige
Proteinpräparat in der gewünschten Konzentration vollständig in bidest. Wasser bzw.
UF-Permeat gelöst und für mind. 4 Stunden quellen gelassen.
CMP-Gele ohne Carrageenan
Die Herstellung von CMP-Gelen ohne Carrageenan war i.d.R. mit einer Einstellung des pH-
Wertes verbunden. Dafür wurde die CMP-Stammlösung, deren CMP-Konzentration um den
Faktor 1,2 höher war, als die gewünschte CMP-Konzentration im fertigen Produkt, mit 1 M
HCl/NaOH bis zu dem erwünschten pH-Wert eingestellt und anschließend auf die jeweilige
CMP-Endkonzentration eingestellt. Proben, bei denen bereits während der pH-Einstellung
die Gelbildung einsetzte, wurden währenddessen mit Eiswasser gekühlt, wodurch die Gelbildung
zeitlich verzögert werden konnte. Für Versuche mit einer Ionenstärkeerhöhung von
500 mmol/l wurde Calciumchlorid-Dihydrat (M=147,02 g/mol) in der Stammlösung entsprechend
mit einer 1,2 fachen Konzentration unter Rühren aufgelöst. Abschließend wurden die
Proben in die dafür vorgesehenen Probengefäße überführt und bis zur Messung bzw. Erhitzung
am Folgetag bei 4°C gelagert. Zur Herstellung temperaturinduzierter Gele wurden die
Proben im Wasserbad bei Temperaturen von 50, 65 bzw. 80°C für 5 bzw. 20 min erhitzt und
anschließend im Eiswasser abgekühlt.
CMP-Carrageenan-Gele
Zur Herstellung von CMP-Carrageenan-Gelen wurde Carrageenan in der Protein-
Stammlösung gelöst. Anschließend wurden die Proben im Wasserbad bei 70°C unter Rühren
für 20 min temperiert, um ein vollständiges Hydratisieren des Carrageenans zu gewährleisten.
Eine gleich behandelte Probe ohne Carrageenanzugabe diente als Referenz. Anschließend
wurden die Proben heiß in die entsprechenden Probengefäße abgefüllt und bis
zur Messung am Folgetag bei 4°C gelagert. Für die Untersuchungen zum Einfluss des pH-
Wertes und der Ionenstärke wurde analog zu der Herstellung der CMP-Gele ohne Carrageenan
verfahren.
Bestimmung der Wasserbindung
Der Wasserbindungszustand wurde mittels niedrigauflösender, gepulster NMR (LR-NMR,
LowResolution-NuclearMagneticResonance) ohne Stoffunterscheidung mit Hilfe des minispec
mq 20. der Fa. Bruker Biospin GmbH (Rheinstetten) charakterisiert. NMR-Messungen
erlauben Aussagen über Bindungs- und Energiezustände von Wassermolekülen in Abhängigkeit
von Ort und Zeit. Als Messgröße wurde die Relaxationszeit (T2-Zeit) ausgewählt, die
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