THESE Anne POSTEC Diversité de populations microbiennes ...

Annexe 3
Caractérisation d’une nouvelle espèce microbienne : exemple de calculs
pour la détermination de la température optimale de croissance.
La gamme de température permettant une croissance est comprise entre 30 et 70°C.
Des cultures ont été réalisées aux températures intermédiaires, et les cinétiques de
croissance correspondantes ont été établies.
Prenons l’exemple de la température fixée à 60°C. Pour cette température, trois tubes
ont été ensemencés et suivis par mesure de l’absorbance à 600 nm toutes les 30 min. Une
première cinétique (absorbance 600 nm) = f (temps) est tracée pour chaque culture et
correspond à la fonction suivante : C(t)= Co x e µt avec Co : concentration initiale
µ : taux de croissance.
60°C
0,45
0,4
absorbance 600 nm
0,35
0,3
0,25
0,2
0,15
0,1
DO 1
DO 2
DO3
0,05
0
0 5 10 15 20 25 30
temps (heures)
La courbe Ln(absorbance 600 nm) = f (temps) est ensuite tracée, ce qui correspond à
l’équation : Ln(C(t))= Ln (Co) + µt.
Le taux de croissance µ max correspond à la pente maximale de la courbe obtenue, dans
sa partie linéaire, i.e. pendant la phase exponentielle. En ne considérant que les points
alignés (les phases de latence et stationnaire sont donc exclues), une courbe de tendance
est insérée (logiciel Excel) : elle donne la pente et le coefficient de détermination R 2 .
Voici l’exemple d’une des trois cultures :
60°C (1) y = 0,3573x - 4,6237
R 2 = 0,996
0
-1
0 2 4 6 8 10
Ln (DO 1)
-2
-3
-4
-5
Temps (h)
238