THESE Anne POSTEC Diversité de populations microbiennes ...

Matériel et méthodes
(e)
(d)
(b)
(a)
(c)
(f)
(g)
(h)
(i)
Figure 4 : Photo de la chaîne de fermentation. (a) gestion informatisée, (b) chromatographie phase
gazeuse , (c) réservoirs d’acide et de base, (d) débit-mètre à bille, (e) condenseur, (f) cuve, (g) bullage
du gaz en sortie de cuve, (h) bain-marie chaud associé à la cuve, (i) pompe péristaltique (les bidons
de milieux frais et de soutirage de culture n’apparaissent pas sur cette photo).
Le balayage gazeux de la culture à l’azote a pour but principal d’établir des conditions
d’anaérobiose au sein du bioréacteur. Ce balayage favorise aussi l’homogénéisation du
milieu de culture et permet l’élimination de produits de fermentation volatils (ex : H 2 , H 2 S)
potentiellement toxiques pour les microorganismes. Un diffuseur ou "sucre" en verre fritté
(Rotaflo, UK), à la porosité optimisée, assure la distribution de l'azote stérile entrant dans la
cuve du fermenteur sous forme de petites bulles. Il est fixé au fond de la cuve par un
bouchon vissant en Téflon. Ce bulleur est relié à un débitmètre à bille (Aalborg, Monsey,
New York) par l’intermédiaire d’un tuyau Pharmed (Masterflex, Norton) et d’un filtre 0,22 µm
Acro50 (Gelman), relié à l’arrivée d’azote.
Une platine en Téflon (Figure 5) est fixée sur la partie
supérieure de la cuve grâce à un collier en inox. Elle est percée
des entrées suivantes :
- une entrée centrale de 12 mm destinée à l’électrode de pH,
- deux entrées de 8 mm destinées à la sonde de température et à
la sortie de l’effluent gazeux via un condenseur en verre,
- huit entrées de 5 mm de diamètre qui sont utilisées pour
Figure 5 : Platine en Téflon
l’addition d’acide, de base, l’entrée de milieu et le soutirage de percée de 11 entrées.
culture, le système de prélèvement et d’inoculation; par l’intermédiaire de tubes en verre.
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