Pengawasan Mutu Baha..
Pengawasan Mutu Baha..
Pengawasan Mutu Baha..
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
Warna yang terbentuk terutama<br />
dari hasil reduksi fosfomolibdat<br />
dan fosfotungstat, oleh karena itu<br />
warna yang terbentuk tergantung<br />
pada kadar tirosin dan triptofan<br />
dalam protein.<br />
Senyawa fenolik juga dapat<br />
membentuk warna biru, sehingga<br />
akan mengganggu penghitungan.<br />
Untuk menghilangkannya lakukan<br />
pengendapan protein dengan<br />
TCA, hilangkan supernatan. Larutkan<br />
kembali protein yang<br />
diendapkan oleh TCA, baru<br />
dianalisis.<br />
Pereaksi yang digunakan dalam<br />
metode Lowry adalah :<br />
1. Natrium karbonat 2% dalam<br />
larutan NaOH 0.1N<br />
2. Tembaga sulfat 0.5% dalam<br />
larutan NaK tartrat 1 % (dibuat<br />
hanya pada waktu akan<br />
digunakan).<br />
3. Campuran 50 ml pereaksi (1)<br />
dengan 1 ml pereaksi (2)<br />
(hanya pada waktu akan<br />
digunakan, hanya stabil selama<br />
1 hari)<br />
4. Pereaksi Folin Ciocalteau (pereaksi<br />
fenol)<br />
Pereaksi ini biasanya tersedia<br />
secara komersil, larutkan<br />
dengan air 1 : 1 sebelum<br />
digunakan. Pereaksi ini dapat<br />
dibuat sendiri dengan cara<br />
sebagai berikut :<br />
Masukkan 100 g natrium<br />
tungstat, 25 g natrium<br />
molibdat, 500 ml akuades,<br />
50 ml asam fosfat 85% dan<br />
355<br />
Analisis Nutrisi<br />
100 ml HCl pekat ke dalam<br />
labu 2 liter.<br />
Campuran direfuks secara<br />
hati-hati selama 10 jam<br />
dengan menggunakan<br />
kondensor. Sesudah didinginkan,<br />
tambahkan ke<br />
dalam labu 150 g litium<br />
sulfat, 50 ml akuades dan<br />
beberapa tetes Br2 (Brom).<br />
Pendidihan dilanjutkan lagi<br />
selama 10 menit dengan<br />
tanpa kondenser,<br />
untuk menghilangkan kelebihan<br />
Brom.<br />
Setelah didinginkan, volume<br />
larutan dijadikan 100<br />
ml dan saring jika perlu.<br />
Filtrat tidak boleh ada<br />
warna kehijauan. Bila ada<br />
maka perlu dilakukan pendidihan<br />
sekali lagi. Ini<br />
merupakan ’reagent stok’.<br />
Larutkan dengan air 1 : 1<br />
sebelum digunakan.<br />
5. Larutan protein standar 0.25<br />
mg/ml (larutan bivine serum<br />
albumin)<br />
Cara Kerja :<br />
1. Pembuatan Kurva Standar<br />
a. Masukkan ke dalam tabung<br />
reaksi : 0 (blanko), 0.1, 0.2,<br />
0.4, 0.6, 0.8, dan 1.0 ml<br />
protein standar. Tambah air<br />
sampai volume total masingmasing<br />
4 ml. Kedalam<br />
masing-masing tabung reaksi<br />
tambahkan 5.5 ml pereaksi (3),<br />
campur merata dan biarkan<br />
selama 10 – 15 menit pada<br />
suhu kamar.<br />
<strong>Pengawasan</strong> <strong>Mutu</strong> <strong>Baha</strong>n / Produk Pangan