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6.7.2. Gradienten-HPLC und LCCC
Die HPLC-Messungen zur Endgruppencharakterisierung von PLA wurden mit einer HPLC-
Anlage der 1100 Serie der Firma Agilent Technologies durchgeführt, die aus einer Pumpe
(G1311A), einem Autosampler (G1313A) und einem Säulenofen (G1316A) besteht. Als
Detektor wurde ein verdampfender Lichstreudetektor (ELSD, Modell PL-ELS1000 der Firma
Polymer Laboratories, UK) eingesetzt. Als Säule kam eine Kieselgel-Säule Nucleosil 1000 Å
7 µm (250 x 0.46 mm) der Firma Micharey-Nagel (Dürren, Deutschland) zum Einsatz.
Zur Bestimmung der Eluentenzusammensetzung am Peakmaximum zum Zeitpunkt der
Elution wurde folgende Gleichung verwendet:
%
THF
% THF ( V V
V
) [ THF
Gleichung 25
V Elutionsvolumen
E
V Totvolumen der Säule
0
E
0 D
] 0
F tG
V Dwellvolumen des chromatographischen Systems
D
% THF prozentuelle Änderung des HFiP-Anteils während des Gradienten
[THF] 0
= THF-Anteil zu Beginn der Elution
F Flussrate
t zeitliche Dauer des Gradienten
G
Die Summe aus Tot- und Dwellvolumen wurde bestimmt, indem eine PLA-Probe in CHCl 3
injiziert, dann bei einem bestimmten Elutionsvolumen der Eluent sprunghaft auf THF
umstellt wurde. Wird vom Elutionvolumen der Probe das Elutionsvolumen zum Zeitpunkt
der Umschaltung subtrahiert, ergibt sich die Summe des Tot- und Dwellvolumens, die im Fall
des verwendeten HPLC-Systems 3.5 mL beträgt.
6.7.3. Bestimmung der Molekulargewichtsverteilung von PHB
SEC und SEC-Lichtstreuung-Messungen in Chloroform
Für die SEC und SEC-LS-Messungen in Chloroform wurde eine HPLC-Anlage der Serie 1200
(Agilent Technologies, Santa Clara, Kalifornien, USA) verwendet. Die Anlage bestand aus
einer binären Pumpe (G1312A) und einem Autosampler (G1329A). Die Detektion erfolgte
durch einen Brechungsindex-Detektor (RI) G1362A (Agilent) und ein
Vielwinkellichtstreudetektor (MALLS) DAWN® DSP (Wyatt Technology Europe GmbH,
Dernbach).
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