Download (3638Kb) - tuprints

dieser Peaks, wie z.B. das des Peaks bei 10.5 mL (s. Abbildung 43B), mit den Massenspektren
von PEG (s. Abbildung 36), kann festgestellt werden, dass sie sich deutlich unterscheiden.
Somit stammen diese Peaks nicht von PEG, sondern von unbekannten Verunreinigungen
wahrscheinlich aus den verwendeten Lösungsmitteln. Diese reichern sich durch das
Abdampfen an.
Da im Pyrogramm der HPLC-Fraktion keine PEG-Peaks identifiziert werden konnten, ist
entweder kein PEG enthalten, oder der PEG-Gehalt liegt unter der Nachweisgrenze der Py-
GC-MS. Deshalb liegt in dieser Fraktion nur oder vorwiegend reines PLA mit der Endgruppe
EG 1 vor. Um die Endgruppe EG 1 zu identifizieren wurde die Fraktion mittels MALDI-TOF-MS
untersucht. Hierzu musste der Peak bei 5.2 mL erneut von den PEG-haltigen Anteilen
getrennt werden. Aufgrund der geringen injizierten Probemengen und der geringen
Peakintensität wären hierfür bei der Fraktionierung mittels HPLC sehr lange Zeiten und
erhebliche Mengen an Lösungsmitteln notwendig.
Eine Alternative zur HPLC-Fraktionierung bietet jedoch die Festphasenextraktion. Wie im
Kap. 4.6 beschrieben, besitzt die Festphasenextraktion die Vorteile der geringen Kosten,
große Zeitersparnis, geringen Verbrauch an Lösungsmitteln und hohe
Anreicherungsfaktoren. Der Nachteil der SPE gegenüber HPLC liegt in der geringeren
Auflösung. Da jedoch im vorliegenden Fall eine gute Auflösung in der HPLC erreicht war,
sollte der Trenneffekt in diesem Fall ausreichend sein, um auch mittels SPE eine saubere
Fraktionierung zu erzielen, da das reine PLA schon bei einem THF-Anteil von ca. 12% eluiert,
während die PEG-PLA-Copolymeren und PEG einen THF-Anteil von ca. 80% zur Elution
benötigen.
Die verwendete SPE-Kartusche war wie die HPLC-Säule mit Kieselgel als stationärer Phase
gefüllt. Daher sollten sowohl PLA als auch PEG in CHCl 3 adsorbiert werden. PLA sollte dann
durch einen geringeren Anteil an THF desorbiert werden, während die PEG-haltigen
Bestandteile erst bei höheren THF-Anteilen eluieren sollten. Um dies zu überprüfen und um
festzustellen, bei welcher Eluentenzusammensetzung reines PLA eluiert, während PLA-PEG-
Copolymeren und PEG adsorbiert sind, wurde versucht, eine Mischung aus PLA und PEG2000
mittels SPE zu trennen. Hierzu wurden mit Rücksicht auf die Beladungsgrenzen der SPE-
Kartusche (siehe Kap. 6.3.4) und das Mengenverhältnis von PLA und PEG beim Abbau 4 mg
PLA und 20 mg PEG2000 in CHCl 3 aufgelöst und auf die Kartusche gegeben. Anschließend
wurden durch Spülen der Kartusche mit Lösungsmitteln unterschiedlicher Anteile an THF
Fraktionen erhalten. Die Fraktionen bei unterschiedlichen Lösungsmittelzusammensetzungen
wurden gesammelt, abgedampft, erneut in CHCl 3 aufgenommen und
dann in HPLC mit dem oben verwendeten Gradienten vermessen. Ziel war es zu prüfen, in
73