Download (3638Kb) - tuprints

Nachdem die Eluentenzusammensetzungen zur Elution vom PLA und PEG ermittelt waren,
konnten nun die angebauten Proben mittels SPE fraktioniert werden. Der
Fraktionierungsvorgang wird in Abbildung 45 schematisch dargestellt.
PLA-PEG-Copolym.
Abbildung 45: Schematische Darstellung der SPE-Fraktionierung der
abgebauten PLA-Proben.
Zunächst wird die SPE-Kartusche mit CHCl 3 befeuchtet und konditioniert, anschließend wird
die abgebaute Probe, die theoretisch 4 mg PLA und 20 mg PEG enthält, abgedampft, in 1 mL
CHCl 3 wieder gelöst und auf die Kartusche gegeben. Alle Substanzen wie PLA, PEG und PLA-
PEG-Copolymere sollten in der Kieselgel-Phase adsorbiert werden. Die Kartusche wird noch
mal mit ca. 6 mL CHCl 3 gewaschen, um eventuelle Verunreinigungen und Nebenprodukte der
Probenlösung zu entfernen. Diese so erhaltene Fraktion in reinem CHCl 3 wird im Folgenden
als SPE-Fraktion 1 bezeichnet. Anschließend wird das reine PLA durch 6 mL einer CHCl 3 /THF-
Mischung (70/30 v/v) von der SPE-Kartusche eluiert und diese Fraktion als SPE-Fraktion 2
bezeichnet. Schließlich werden die PEG-haltigen Bestandteile mit 100% THF von der
Kartusche gespült und in der SPE-Fraktion 3 gesammelt.
Nach dem oben beschrieben Verfahren wurde eine durch den Abbau von PLA1 erzeugte
Probe (PLA-PEG7) fraktioniert. Vor der anschließenden MALDI-TOF-MS-Untersuchung der
Fraktionen wurde zunächst der Erfolg der SPE-Aufreinigung unter Verwendung des oben
75