Untersuchungen von Varianten des Polyomavirus-Hüllproteins VP1 im
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Gleichgewicht zwischen Kapsomeren und offenen Kapsiden bei dieser Variante stärker<br />
auf Seiten der Kapsomere lag (Abbildung 68). Unter Nichtassemblierungsbedingungen<br />
in Gegenwart <strong>von</strong> EDTA besaß das Protein jedoch keine Tendenz zur Aggregation, und<br />
bei HPLC-Gelfiltrations-Chromatographie wurde ein scharfer Peak <strong>von</strong> freien<br />
Kapsomeren beobachtet.<br />
Bei dem Protein <strong>VP1</strong>-WW292 wurde keine Aggregation beobachtet. Bei HPLC-<br />
Gelfiltrationsanalysen zeigte sich jedoch, dass das Assemblierungsgleichgewicht<br />
nahezu vollständig auf Seiten der Kapsomeren lag, weniger als 3 % <strong>des</strong> Proteins lag als<br />
Kapsid vor (Abbildung 68). Anscheinend störte die WW-Domäne hier die Struktur <strong>des</strong><br />
Proteins so weit, dass eine effektive Aneinanderlagerung der Kapsomere nicht mehr<br />
möglich war.<br />
a<br />
Absorption [mAU]<br />
b<br />
1.4<br />
1.2<br />
1.0<br />
0.8<br />
0.6<br />
0.4<br />
0.2<br />
0.0<br />
280 nm<br />
260 nm<br />
0 2 4 6 8 10 12 14 16<br />
Volumen [ml]<br />
100 nm<br />
Abbildung 69. In vitro-Assemblierung <strong>von</strong> <strong>VP1</strong>-3C-WW150. Mit Gelfiltrations-<br />
Chromatographie wurde eine 100 %ige Assemblierungseffizienz nachgewiesen (a) und <strong>im</strong><br />
Elektronenmikroskop wurde eine homogene Population virusanaloger Partikel beobachtet (b).
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