11.12.2012 Aufrufe

Untersuchungen von Varianten des Polyomavirus-Hüllproteins VP1 im

Untersuchungen von Varianten des Polyomavirus-Hüllproteins VP1 im

Untersuchungen von Varianten des Polyomavirus-Hüllproteins VP1 im

MEHR ANZEIGEN
WENIGER ANZEIGEN

Erfolgreiche ePaper selbst erstellen

Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.

142<br />

al., 1996). Im Genom <strong>des</strong> Maus-<strong>Polyomavirus</strong> gibt es jedoch keine homologen<br />

Sequenzen zu diesen Signalen.<br />

a<br />

Nhe I<br />

Bam HI<br />

b<br />

Nhe I<br />

Bam HI<br />

amp<br />

amp<br />

Bam HI<br />

colE1<br />

Bam HI<br />

<strong>VP1</strong> , VP2, VP3<br />

colE1<br />

GFP<br />

VP2<br />

spä t es Transkript<br />

SV40pA<br />

spätes pr<strong>im</strong>äres Transkript<br />

Bgl II<br />

ori<br />

pX4f-pY-EarlyDsRed<br />

(8.3 kb)<br />

pA<br />

ori<br />

pX5f-pY-LateGFP<br />

(8.2 kb)<br />

pA<br />

frühes Transkript<br />

Abbildung 82. Plasmide pX4f-pY-EarlyDsRed (a) und pX5f-pY-LateGFP (b) zur Expression<br />

<strong>von</strong> DsRed bzw. GFP unter Kontrolle <strong>des</strong> frühen bzw. späten <strong>Polyomavirus</strong>-Promotors.<br />

Für eine Untersuchung <strong>des</strong> Einflusses <strong>von</strong> Signalsequenzen zur DNA-Verpackung<br />

wurde eine Komplementierung <strong>des</strong> Virusgenoms zur Replikation mit zwei episomalen<br />

Vektoren geplant, so dass potentielle Verpackungssignale min<strong>des</strong>tens auf einem der<br />

beiden Vektoren vorhanden sein müssten. Zur Unterscheidung der beiden Vektoren<br />

wurden zwei verschiedene Reportergene verwendet, die für das grünfluoreszierende<br />

Nsi I<br />

frühes pr<strong>im</strong>äres Tr anskript<br />

DsRed<br />

Sph I<br />

SV40 p A<br />

T-Antig<br />

e ne<br />

Sph I<br />

Sph I<br />

Sph I<br />

Nsi I<br />

Sph I

Hurra! Ihre Datei wurde hochgeladen und ist bereit für die Veröffentlichung.

Erfolgreich gespeichert!

Leider ist etwas schief gelaufen!