Untersuchungen von Varianten des Polyomavirus-Hüllproteins VP1 im
Untersuchungen von Varianten des Polyomavirus-Hüllproteins VP1 im
Untersuchungen von Varianten des Polyomavirus-Hüllproteins VP1 im
Erfolgreiche ePaper selbst erstellen
Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.
142<br />
al., 1996). Im Genom <strong>des</strong> Maus-<strong>Polyomavirus</strong> gibt es jedoch keine homologen<br />
Sequenzen zu diesen Signalen.<br />
a<br />
Nhe I<br />
Bam HI<br />
b<br />
Nhe I<br />
Bam HI<br />
amp<br />
amp<br />
Bam HI<br />
colE1<br />
Bam HI<br />
<strong>VP1</strong> , VP2, VP3<br />
colE1<br />
GFP<br />
VP2<br />
spä t es Transkript<br />
SV40pA<br />
spätes pr<strong>im</strong>äres Transkript<br />
Bgl II<br />
ori<br />
pX4f-pY-EarlyDsRed<br />
(8.3 kb)<br />
pA<br />
ori<br />
pX5f-pY-LateGFP<br />
(8.2 kb)<br />
pA<br />
frühes Transkript<br />
Abbildung 82. Plasmide pX4f-pY-EarlyDsRed (a) und pX5f-pY-LateGFP (b) zur Expression<br />
<strong>von</strong> DsRed bzw. GFP unter Kontrolle <strong>des</strong> frühen bzw. späten <strong>Polyomavirus</strong>-Promotors.<br />
Für eine Untersuchung <strong>des</strong> Einflusses <strong>von</strong> Signalsequenzen zur DNA-Verpackung<br />
wurde eine Komplementierung <strong>des</strong> Virusgenoms zur Replikation mit zwei episomalen<br />
Vektoren geplant, so dass potentielle Verpackungssignale min<strong>des</strong>tens auf einem der<br />
beiden Vektoren vorhanden sein müssten. Zur Unterscheidung der beiden Vektoren<br />
wurden zwei verschiedene Reportergene verwendet, die für das grünfluoreszierende<br />
Nsi I<br />
frühes pr<strong>im</strong>äres Tr anskript<br />
DsRed<br />
Sph I<br />
SV40 p A<br />
T-Antig<br />
e ne<br />
Sph I<br />
Sph I<br />
Sph I<br />
Nsi I<br />
Sph I